Patrones microfluídicos y seguimiento basado en fluorescencia del crecimiento bacteriano unicelular
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:27 min. • October 30th, 2025
Comience con un cultivo bacteriano marcado con fluorescencia agregado a un tampón libre de carbono.
Centrifugar para granular las bacterias y desechar el sobrenadante.
Vuelva a suspender el gránulo en un tampón fresco sin carbono que contenga un detergente suave.
La falta de una fuente de carbono detiene el crecimiento, mientras que el detergente evita la formación de grumos y mantiene las células suspendidas.
Cargue la suspensión bacteriana en una jeringa y conéctela a una bomba.
Inyecte la suspensión en la entrada de un chip microfluídico que contiene un canal con trampas incrustadas en el piso.
Retire lentamente el líquido de la salida del canal.
A medida que el líquido retrocede, las fuerzas capilares guían a las bacterias hacia la salida.
En este proceso, las células bacterianas individuales se asientan en las trampas, lo que da como resultado un patrón bacteriano.
Enjuague el canal con un caldo precalentado y rico en nutrientes continuamente.
Las bacterias reanudan el crecimiento y forman microcolonias dentro de las trampas.
Utilice la microscopía de fluorescencia para capturar imágenes de lapso de tiempo y analizar el crecimiento bacteriano en un entorno controlado.
Pipetear un mililitr
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