Visualización de la distribución de proteínas bacterianas en tres dimensiones mediante imagen de fluorescencia

Comienza con una lámina sellada que contiene células bacterianas etiquetadas con un marcador fluorescente rojo citoplasmático y un marcador fluorescente verde específico de proteína.

Observa la lámina bajo un microscopio de fluorescencia.

Localiza un campo que contenga células bacterianas bien aisladas y céntrate en el centro de una célula representativa.

Establezca el primer canal de fluorescencia y adquiera una imagen de pila z en parámetros específicos para capturar la forma tridimensional de la célula representativa y sus celdas cercanas.

Luego, cambia al segundo canal de fluorescencia y adquiere otra imagen z-stack de las mismas celdas con los mismos parámetros.

Captura la distribución de proteínas bacterianas dentro de las células.

Recorta células individuales de cada pila z para aislarlas y poder analizarlas en una sola célula.

Alinea estas imágenes para visualizar la distribución de proteínas bacterianas en relación con la forma celular, permitiendo un análisis preciso durante las interacciones huésped-patógeno.

Inmediatamente después de sellar la cubierta, coloque la lámina sobre un escenario de microscopio y, tras cinco minutos de equilibrio térmico, utilice las ruedas de enfoque