Un dispositivo de microfluidos con los patrones de Surco para el estudio del comportamiento celular

Mi nombre es Jiang, soy un becario de Harvard y MIT, salud, ciencia y tecnología. Por lo tanto, gracias a mi experiencia en este laboratorio, puedo generar un nuevo dispositivo de predicción para estudiar el comportamiento celular. Puedo generar un dispositivo de gradiente muy novedoso, así como también puedo generar integrarlo a mi dispositivo de predicción.

El dispositivo TC puede manipular con precisión la interacción de la célula y la interacción de la célula, así como el contacto del factor solar de la célula. Entonces, usando el sistema TC, puedo estudiar para comprender la biología celular básica, así como aplicar algo de la biología del desarrollo, así como algo de bio bio bio bio bio bio bio Mi nombre es Amir Manchi y soy estudiante de pregrado y profesor Haan lab en Harvard, División de Ciencias de la Salud y Tecnología del MIT.

Y he estado trabajando en dispositivos micro flílicos y hemos estado tratando de demostrar como prueba de principio que los dispositivos microfluídicos son dispositivos de gran potencial para el cultivo de células y hacer diferentes estudios, como estudios de toxicidad, y también hemos tratado de estudiar y optimizar la caracterización de fluidos dentro de estos dispositivos en función de los caudales, geometría y otros tipos diferentes de parámetros. En este momento estamos comenzando desde la sala de microfabricación y lo que vamos a hacer es que estamos tratando de hacer algunos dispositivos microfluídicos, para hacer que los dispositivos micro fólicos sucedan, necesitamos algunos patrones de obleas de silicio y necesitamos algunos moldes de PDMS encima de ellos. Este polímero PDMS es en realidad una mezcla de dos cosas diferentes.

Es una mezcla de base de elastómero de silicio y también agente de corriente de elastómero de silicona. La forma en que mezclamos estos dos es que los mezclamos en una proporción de 10 a uno, es decir, 10 de base y uno de agente de curado. Ahora quiero unos 20 gramos de mi base aquí.

También necesito dos gramos del agente de curado y el agente de curado es mucho menos denso. Llegará mucho más rápido y tengo que tener un poco de cuidado. Así que ahora son alrededor de 22 y quiero mezclar la base y el agente de curado.

Así que usaré pipe para hacer eso. Trataré de mezclarlo todo lo que pueda muy bien. Quiero verter este polímero PDMS encima de las obleas de silicio que en realidad tienen un patrón encima de ellas y la oblea de silicona ayuda a dar patrón a los moldes de PDMS.

De hecho, puedes notar que tengo dos obleas de silicio aquí mismo y la razón es que una de ellas es para la capa superior de nuestro dispositivo micro fillic y la otra es para la capa inferior. Necesitamos dos capas en los dispositivos micro frílicos porque estamos tratando de tener un canal dentro y toda la historia detrás de los dispositivos micro fluídicos es que queremos tener flujo dentro de esos canales. Así que tengo que verter esta mezcla encima de las dos obleas de silicona porque tengo muchas burbujas dentro de esta mezcla.

Quiero sacar estas burbujas y lo que hacemos es que usamos el vacío para sacar esas burbujas. Estamos de vuelta en la zona principal del laboratorio y como os dije antes porque dentro de la mezcla de PDMS hay un montón de burbujas y queremos eliminarla y voy a colocar las mezclas encima de las obleas de silicio dentro de la cámara de vacío. Voy a cerrar la cámara y voy a abrir la aspiradora, después de hacer esto, vamos a llevar los moldes de PDMS dentro de un horno durante la noche para hacerlos más sólidos.

Muy bien, ahora estamos en el laboratorio y queremos ensamblar estos micro dispositivos fólicos. Lo que vamos a hacer es que vamos a tomar los moldes de PDMS, que han estado dentro de la incubadora durante la noche y se han formado, han formado los patrones que han estado en las obleas de silicio y voy a usar dos patrones diferentes. En el lado izquierdo puedes ver el micro canal, que va a ser la capa superior y en el derecho puedes ver algunos patrones de líneas verdes que van a ser la capa inferior.

Y esto es, esto formará las ranuras dentro del micro dispositivo. Estoy empezando por cortar estos geles para poder tener la capa superior para que se deshaga fácilmente de la oblea de silicona. Y lo que haré es que lo transferiré a estas placas de Petra boca arriba para que los patrones queden hacia arriba.

Y voy a intentar lo mismo con los surcos, que eran los patrones de líneas verdes. Así que estos van a formar la capa inferior. Así que una vez que el gel esté cortado, lo voy a transferir a la placa de Petra y para evitar que el polvo se acumule encima de los patrones, voy a pegarlos con cinta adhesiva.

El siguiente paso es perforar los extremos de los canales para permitir que la célula y los medios fluyan hacia adentro y hacia afuera. Lo que voy a hacer es que debido a que tengo una superficie amplia aquí y no puedo ver los patrones yo mismo, voy a usar esto para poder ver los canales y voy a perforar los dos extremos. Así que voy a perforar un gran golpe aquí, por lo que tiene que poder tener un pedido de reserva y en el otro lado voy a perforar un pequeño agujero para poder usar tubos de polietanol en el otro lado.

Ahora estamos en la sala de microfabricación y el siguiente paso es unir las dos superficies diferentes que tenemos. Para hacer eso, está utilizando esta máquina que se llama limpiador de plasma y el proceso se llama tratamiento con plasma. Lo que sucede dentro de esta cámara es que vamos a tener un entorno de plasma y en la interacción de la superficie del plasma lo que va a suceder es que el plasma va a romper el débil equilibrio de la superficie y lo va a reemplazar con grupos químicos altamente reactivos.

Entonces lo que va a pasar ahora es que voy a sacar las cintas que puso aquí para evitar el polvo y voy a poner estos moldes dentro de la cámara. Voy a cerrar esta puerta por completo, primero encender y luego bombear y luego estamos listos para irnos. Lo recogeremos en cinco a 10 minutos.

Ahora quiero apagarlo, así que apago la bomba y la energía y luego abro la cámara. En realidad, hay una presión negativa aquí, por lo que es posible que escuches el sonido. Eso es lo que, debido a la presión negativa, así que lentamente saco mis moldes.

Como tenemos las dos superficies del patrón hacia arriba, voy a tomar la capa inferior, colocarla en mi mano izquierda y voy a tomar la capa superior, invertirla y colocarla encima de mis ranuras y luego empujar las capas una encima de la otra. La fuerza adhesiva y la permanencia son la ventaja de utilizar esta máquina de tratamiento con plasma. Y lo que ves aquí ahora es que puedes ver realmente el canal en la capa superior y puedes ver los patrones ranurados en la capa inferior y está listo para el siguiente paso.

Y luego traer aquí esta sala de cultura, esta comida de cultura y luego plato de puerta abierta. Y luego podemos cargar la fibronectina, sacar los 60 microlitros de fibroína y luego cargarla en el dispositivo. Y luego, para generar algo de flujo dentro del dispositivo para inducir un pequeño recubrimiento, la vibración dentro del canal, podemos succionar suavemente la salida.

Después de eso, podemos colocar este dispositivo en la incubadora y es una hora después de una hora enfriando el interior vibratorio de la incubadora. Simplemente sacamos la muestra de dis de la incubadora y luego usamos cinco óxidos, tres, tres óxidos de fibra. Simplemente enviamos la fusión y la sombra y luego ponemos los medios y luego también usamos el condado de la celda usando el contador de celdas.

Por lo general, la ciudad de un millón de células premier sentada dentro del dispositivo. Entonces, después de la disociación, podemos empujar solo un par de veces el champú y luego sacar la suspensión de ventas y luego cargar el interior del canal para cargar mejor la celda dentro del canal. Puedes fluir suavemente con el aspirado.

La suma de medios y la suspensión superficial aspiran a través de la celda de salida generalmente sembrando automáticamente, ya sabes, el selectivo, el canal global. Después de eso, simplemente podemos desmontar y poner la incubadora durante una hora, es hasta que la celda se extienda completamente dentro del canal. Y luego podemos infundir el anexo cinco y el yoduro de utilería, así como el hidroperóxido.

Y luego estudia tu ensayo de hipótesis del tiempo. Podemos tomar la muestra dentro de un alimento de cultivo de tejidos y luego podemos hacer la solución de dos medios DM DM de molino, así como 20 microlitros de anexo cinco de 40 microlitros de yodo de apoyo, 100 mili de peróxido de hidrógeno. Y luego tome el medio de dos metros con el anexo cinco, yoduro de apoyo, hidro perside, y luego coloque la jeringa después.

Coloque los dos medios de molienda y el anexo cinco yoduro de utilería, hidro a un lado. Podemos simplemente poner la solución dentro de los techos y luego quitar la burbuja y luego conectar el oso C. Este es un techo hermético de molino cálido Hamilton a gas.

Este es de tres osos. Este es el de los techos de techo desechables. Esta es una aguja de calibre 27.

Este es un tubo de polietileno PE 20. Después de cargar la solución dentro de una jeringa, puede simplemente acoplar el tiempo lleno y empujar lleno y empujar lleno y empujar y luego, a veces, un poco de punta, golpear una jeringa y luego quitar la burbuja y también tirar de la solución. Entonces, una vez más, empuje completamente, retire la burbuja y luego vuelva a programar suavemente.

Así que tome la solución para una comida y luego podemos cambiar la válvula. Empuje, empuje la solución a través de la válvula de tres vías y completamente en el tubo. Entonces, finalmente la solución, sale por la punta de nuestro tubo y luego podemos conectar el tubo al micro dispositivo y comenzar a infundir un micro por minuto.