Aislamiento funcionalizado de células diana basadas en alambres: una técnica ex vivo para aislar células cancerosas de sangre periférica enriquecida

Las moléculas de adhesión de células epiteliales, o EpCAM, son glicoproteínas transmembrana de superficie sobreexpresadas en células epiteliales de rápida proliferación en cánceres de próstata. Para aislar las células que expresan EpCAM, comience con un alambre de grado médico con una punta recubierta de oro funcionalizada. Capas de funcionalización de un gel polimérico que contiene anticuerpos específicos de EpCAM unidos covalentemente.

Sumerja el cable en una suspensión de sangre periférica que contenga células cancerosas marcadas con fluorescencia. Asegúrese de que la parte funcionalizada permanezca sumergida en la suspensión de sangre. Las EpCAM en las células cancerosas reconocen y se unen a sus anticuerpos específicos funcionalizados en el cable.

Lave con un tampón para eliminar las células no unidas de la superficie del alambre. Doble el cable y móntelo en un portaobjetos de vidrio que contenga tampón, con la parte funcionalizada sumergida en el tampón. Use un microscopio de fluorescencia para verificar la fluorescencia brillante del citoplasma y los núcleos celulares y confirmar la presencia de células capturadas en el cable.

Trate el alambre con un tampón de liberación. La