Ensayo de electroquimioluminiscencia para la cuantificación de los niveles de proteínas diana en el lisado cerebral

Para la detección cuantitativa de una proteína específica en el lisado cerebral de ratón mediante electroquimioluminiscencia, ECL, inmunoensayo, comience con una placa de ensayo de pocillos múltiples.

Los pozos comprenden electrodos conductores de trabajo y contraelectrodos, completando el circuito eléctrico. Una capa dieléctrica separa los electrodos, mejorando la sensibilidad del ensayo.

Agregue anticuerpos monoclonales primarios de ratón contra la proteína diana a los pocillos. Los electrodos de trabajo, con mayor capacidad de unión, facilitan que los anticuerpos se inmovilicen sobre ellos.

Incubar con una solución que contenga proteínas, uniéndose a las superficies de unión restantes del pocillo, reduciendo la interferencia de fondo.

Agregue lisado de fracción nuclear de cerebro de ratón. La proteína diana en el lisado se une específicamente a los anticuerpos monoclonales.

Agregue anticuerpos policlonales no marcados, reconociendo y uniéndose a los epítopos de la proteína, que se une a los anticuerpos monoclonales primarios en el electrodo. Agregue anticuerpos secundarios específicos marcados con complejo de rutenio, uniéndose a los anticuerpos no marcados. Agregue un tampón ad