JoVE Encyclopedia of Experiments
Inmunología
0 vistas • 2:45 min • July 8th, 2025
Tome una emulsión adyuvante que contenga glicoproteínas de oligodendrocitos de mielina, o MOG, una proteína de la vaina de mielina nerviosa y Mycobacterium tuberculosis inactivada. Inyectarlo por vía subcutánea en la espalda del ratón.
A continuación, inyecte exotoxinas derivadas de bacterias por vía intraperitoneal, lo que altera la barrera hematoencefálica.
El Mycobacterium inyectado por vía subcutánea imita la infección local, atrayendo células inmunitarias, incluidas las células presentadoras de antígenos o APC.
Las APC interactúan con los MOG, procesándolos y presentándolos en los principales complejos de histocompatibilidad, MHC.
Las APC activadas migran a los ganglios linfáticos, donde las células T interactúan con las APC, convirtiéndose en células T autorreactivas.
Estas células T ingresan al torrente sanguíneo, cruzan la barrera y se infiltran en el sistema nervioso central, SNC.
En el SNC, las células T autorreactivas interactúan con las células que expresan MOG, promoviendo la infiltración de células inmunitarias.
Los monocitos infiltrados se diferencian en macrófagos, liberando citocinas inflamatorias y especies reactivas de oxígeno, causando la muerte celular de los oligodendrocitos productores de mielina.
Las células B interactúan con las células T autorreactivas, se diferencian en células plasmáticas y secretan autoanticuerpos contra MOG, lo que lleva a la degradación de la vaina de mielina.
La desmielinización afecta la transmisión de señales nerviosas, induciendo encefalomielitis autoinmune.
Comience inyectando por vía subcutánea a ratones hembra de 10 a 13 semanas de edad con 200 microgramos de glicoproteína de oligodendrocitos de mielina, emulsionada en 200 microlitros de adyuvante completo de Freund que contiene 400 microgramos de Mycobacterium tuberculosis. Inmediatamente, y 24 horas después, inyectar intraperitonealmente a los ratones 0,2 microgramos de toxina de la tos ferina en 200 microlitros de PBS.
Es esencial que los ratones se hayan adaptado tanto al manejo como al entorno experimental antes de la inducción para evitar inducir estrés, lo que puede prevenir el desarrollo de síntomas clínicos.
Una semana después de la inyección, examine a los ratones diariamente para detectar síntomas clínicos como se describe en la tabla.