Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:29 min. • July 8th, 2025
Tome un portaobjetos de flujo que contenga una bicapa lipídica soportada, o SLB.
El SLB se conjuga con ligandos específicos (molécula de adhesión intercelular 1 o ICAM-1 y anticuerpos anti-CD3) marcados con fluoróforos.
Agregue células T y anti-CD107a Fab marcado con fluoróforo, el fragmento de unión al antígeno de un anticuerpo contra el marcador de degranulación.
El complejo receptor de células T-CD3 o TCR-CD3 se une al anticuerpo anti-CD3, desencadenando el TCR.
La señalización de adentro hacia afuera inducida por el desencadenamiento activa las integrinas en la superficie, que se unen al ICAM-1 inmovilizado.
La conjugación induce la reorganización del citoesqueleto: reordenamiento de microtúbulos y polimerización de actina que conduce a la propagación lateral de la célula en la superficie de SLB.
La propagación permite que más interacciones ligando-receptor formen un grupo de activación supramolecular o SMAC, creando una sinapsis inmune.
Los gránulos líticos de células T se mueven a lo largo de los microtúbulos y se fusionan con la membrana plasmática, exponiendo marcadores de degranulación en la superficie celular, que se unen a la Fab anti-CD107a.
Con un microscopio de fluore
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