Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:49 min. • July 8th, 2025
Tome una placa multipocillo con filtros en la base.
Agregue una muestra de prueba que contenga diferentes citocinas.
Agregue diferentes conjuntos de microesferas diferenciadas por tamaño e intensidad de fluorescencia interna.
Cada conjunto se conjuga con un anticuerpo dirigido a una citocina específica.
Incube la placa en la oscuridad bajo agitación.
Los anticuerpos se unen a sus citoquinas diana, inmovilizándolas en las microesferas.
Aplique una aspiradora para eliminar las citocinas no unidas. Las citocinas unidas a microesferas se retienen debido al tamaño de poro más pequeño de la membrana.
Agregue un cóctel de anticuerpos de detección conjugados con biotina que se unen a las citocinas unidas a microesferas.
Agregue una estreptavidina conjugada con reportero fluorescente e incube en la oscuridad bajo agitación. La estreptavidina se une a la biotina, inmovilizando al reportero en el complejo de microesferas.
Retire las moléculas no unidas y vuelva a suspender las microesferas.
Usando citometría de flujo, identifique las citocinas unidas determinando el tamaño y la fluorescencia interna de las microesferas.
Para determinar la cantidad de una citocina específica, mida la intensida
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos