Imágenes de lapso de tiempo de la división de células madre neurales de ratón mediante microscopía confocal

Tome una placa de pocillos múltiples que contenga células madre neurales adheridas o NSC aisladas de un cerebro de ratón transgénico. Estas NSC contienen una proteína etiquetada con fluorescencia que es específica de la primera fase de crecimiento, o G1.

A medida que el NSC se divide, emite fluorescencia en la fase G1 del ciclo celular mientras que no emite fluorescencia en otras fases.

Coloque la placa en una cámara de imágenes de microscopio de escaneo láser confocal, mantenida a una temperatura controlada.

Seleccione la lente del objetivo deseada y ajuste la intensidad de fluorescencia.

Configure los parámetros para la creación de imágenes de lapso de tiempo.

Elija la opción de imagen grande y programe la adquisición de imágenes a intervalos regulares durante la duración deseada.

Utilice un escáner resonante de alta velocidad para evitar el fotoblanqueo y mantener una alta resolución.

Utilice la configuración de campo claro para visualizar la forma de la celda y use un filtro fluorescente apropiado para capturar la fluorescencia.

Inicie imágenes de lapso de tiempo del NSC para visualizar diferentes fases del ciclo celular.

Prepare un microscopio de escaneo láser confocal para obtener im