Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:15 min. • August 7th, 2025
Tomemos un cachorro de ratón modificado genéticamente que lleva un casete STOP flanqueado por loxP que bloquea la expresión de proteína fluorescente roja o RFP.
Asegure al cachorro en un marco estereotáxico hecho a medida y cúbralo con hielo para mantener la anestesia.
Desinfecte el cuero cabelludo y marque lambda como punto de referencia.
Alinee la aguja de inyección con las coordenadas estriatales en relación con lambda y perfore el cráneo.
Retraiga la aguja a la superficie del cráneo, luego insértela en la profundidad objetivo.
Inyecte el vector viral mezclado con colorante en el cuerpo estriado a una velocidad controlada. El vector codifica proteínas fluorescentes verdes o GFP y Cre recombinasa.
Retire la aguja lentamente para evitar el reflujo de la solución.
Retire al cachorro y permita la recuperación.
En las células estriatales, el virus libera su genoma, lo que permite la expresión de Cre recombinasa y GFP. Cre extirpa el casete STOP flanqueado por loxP, activando la expresión RFP.
La expresión simultánea de GFP y RFP confirma la manipulación exitosa de genes.
Coloque al cachorro con el guante en la bandeja para la cabeza y coloque un poco de hielo picado alrededor de la manga de l
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