Ascendente aórtica Constricción en ratas para la Creación de la sobrecarga de presión hipertrofia cardíaca Modelo

Hola, soy Aji Kumar Gs de la División de Biología de Enfermedades Cardiovasculares Raj Gandhi, centro de Biotecnología de la India. Estoy trabajando bajo la guía de karta de proceso y en este video demostraremos un procedimiento paso a paso para la construcción ascendente de I OTE en ratas. En nuestro laboratorio, utilizamos este modelo anual para estudiar la fisiopatología y los mecanismos moleculares subyacentes en la hipertrofia cardíaca y la insuficiencia cardíaca progresiva.

También utilizamos este modelo para estudiar la hipertensión pulmonar asociada a la izquierda a la insuficiencia cardíaca. Así que comencemos y esteticemos al animal y lo mantengamos en posición supina. Realizar la intubación endotraqueal haciendo una incisión a mitad de camino entre dos anillos traqueales e insertando la cánula traqueal, que a su vez está conectada a un ventilador para roedores.

A continuación, haga una incisión en la piel de unos dos centímetros de largo en la región izquierda del pecho, entre la segunda y la tercera costilla, y separe las capas musculares. Para visualizar la constricción de la iota de la porción ascendente de la iota se debe llevar a cabo utilizando una pinza de titanio de pequeño tamaño con un aplicador, oponerse a las costillas y luego suturar las capas musculares y la piel en un patrón interrumpido. Después de la extracción del tubo endotraqueal, cierre el músculo de la tráquea, las capas y la piel y permita que el animal se recupere.

El procedimiento se realizó después de obtener la aprobación del comité institucional de ética animal. Antes de la cirugía, desinfecte el campo quirúrgico con alcohol al 70% y mantenga la almohadilla térmica aséptica. Mantenga el ventilador para roedores y la unidad de anestesia listos para la cirugía.

Esterilizar el instrumental quirúrgico en autoclave. Los principales instrumentos quirúrgicos para la constricción iótica ascendente son guantes estériles, pinzas para el pulgar, tijeras, cuchillas quirúrgicas, pinzas de titanio de pequeño tamaño y pinzas arteriales aplicadoras con gasa en caso de sangrado, un material de sutura de prolina porta agujas, sutura de seda trenzada y aguja. Mantener a la rata bajo un paraguas antibiótico durante 24 horas y estetizar las ratas en una cámara de inducción con flúor ISO al 3% mezclado con oxígeno al cien por cien.

Retire el pelaje del escote y la región izquierda del pecho de la rata y mantenga al animal en la parte superior. Una almohadilla térmica. Mantenga la anestesia con fluoruro ISO al 1,5% de reflejo del pedal de control para confirmar el éxito de la anestesia.

Desinfectar el área quirúrgica con una solución de povidona yodada seguida de alcohol al 70%. Repita el procedimiento tres veces. Coloque un paño estéril sobre el animal, exponiendo únicamente el sitio quirúrgico.

Haga una incisión en la piel paralela a la tráquea y separe el tejido subyacente. Con el fin de exponer la tráquea. Aplica un lazo de hilo de seda por debajo de la tráquea y levántalo suavemente hacia arriba.

Haga una incisión a mitad de camino entre dos anillos de cartílago e inserte la cánula traqueal. Conecte la cánula traqueal a un ventilador para roedores. El ventilador debe ajustarse a una frecuencia respiratoria de 50 respiraciones por minuto.

Volumen corriente 1,7 ml y tiempos de inspiración 0,6 segundos. Haga una incisión en la región izquierda del tórax entre la segunda y la tercera costilla. Los músculos intercostales deben separarse capa por capa.

Se debe tener cuidado para evitar cualquier lesión en los pulmones al hacer la incisión entre las costillas. Después de retraer las costillas, ubique cuidadosamente la porción ascendente del iota manipulando suavemente el tejido graso. La flecha indica la parte ascendente del iota.

Coloque una pinza de titanio de pequeño tamaño alrededor de la iota ascendente con la ayuda de un aplicador, constriñendo así la iota del 50 al 60% del diámetro original. Después de la constricción, reposicione el corazón y aproxime las costillas con sutura de prolina simultáneamente Detenga el ventilador durante unos dos a cuatro segundos para volver a inflar los pulmones. Coloque los músculos en capas con prolina, seguidas de piel con suturas de seda en un patrón de sutura interrumpido.

Reduzca gradualmente la frecuencia respiratoria establecida en el ventilador y observe al animal para ver si respira espontáneamente. Retirar la cánula traqueal una vez restablecida la respiración espontánea y regular. Ahora la anestesia se mantiene a través del cono de la nariz.

Cierre la abertura entre los anillos traqueales con suturas de prolina. Cierre las capas musculares y la piel con suturas de prolina y seda respectivamente. Aplique la solución de povidona yodada sobre el área quirúrgica como inyección de analgesia postoperatoria.

La solución salina intraperitoneal de Tremadol puede administrarse por vía intraperitoneal. Si aparecen signos de deshidratación, baje gradualmente la anestesia a la posición de apagado después de que el animal se recupere, se traslade a la jaula y administre amoxicilina por vía oral mezclada con agua potable durante siete días. La intensidad de la sobrecarga de presión producida por la constricción de iota ascendente se puede determinar observando el gradiente de presión a través del sitio de constricción ótica mediante ecocardiografía bidimensional.

El panel izquierdo de la figura muestra el eco Doppler de una rata aórtica constreñida con un gradiente de presión de 63 mm de mercurio. Y el panel de la derecha representa una rata controlada simuladamente sin un gradiente de presión significativo a través del iota. El panel superior muestra la ecocardiografía en modo M del ventrículo izquierdo en ratas, ocho semanas después de la cirugía, y el panel inferior representa el control simulado, el grosor del tabique interventricular y el grosor de la pared posterior del ventrículo izquierdo aumentaron significativamente, mientras que el diámetro interno del ventrículo izquierdo se redujo significativamente en las ratas sometidas a constricción iótica.

En comparación con los grupos de control operados simuladamente, se observa una hipertrofia cardíaca significativa en las ratas sometidas a constricción iótica ascendente después de ocho semanas de cirugía en comparación con los grupos de control operados simuladamente. Hola, soy Raj. Aquí explicamos el procedimiento para la constricción de la iota ascendente en rata.

La principal ventaja de este modelo es el desarrollo gradual de hipertrofia cardíaca e insuficiencia cardíaca. De manera similar a la situación clínica en la hipertensión crónica en esta madre, se debe tener cuidado en la aplicación de la pinza Titanic para la constricción del iota. Lo más importante es que la aplicación de la pinza Titanic debe ser suficiente para producir una constricción crítica para el estrés de más de 20 a la izquierda, pero no lo suficientemente grave como para producir una falla electrónica aguda y edema pulmonar y también se debe tener cuidado para evitar cualquier lesión en los pulmones al hacer la incisión entre las costillas.

Los ventiladores deben colocarse durante tres o cuatro segundos mientras se oponen a las costillas para volver a inflar los pulmones. Así que gracias por ver este video y buena suerte con tus experimentos.