Medición de la estabilidad de proteínas en la sala de embriones de pez cebra Utilizando fluorescencia Decay Después Fotoconversión (FDAP)

El objetivo general del siguiente experimento es medir la estabilidad de proteínas intracelulares y extracelulares en embriones vivos de pez cebra. Esto se logra marcando una proteína de interés con una proteína fluorescente fotoconvertible e inyectando ARNm, que codifica la fusión, así como un tinte fluorescente en embriones de pez cebra. A continuación, la proteína de fusión fotoconvertible se fotoconvierte, cuyo pulso marca la proteína.

En este ejemplo, se segrega la proteína de fusión, luego se monitorea a lo largo del tiempo la disminución de la intensidad de fluorescencia fotoconvertida intra y extracelular y se le asigna una función exponencialmente decreciente para determinar las vidas medias intracelulares y extracelulares de la proteína de fusión. Los resultados muestran la estabilidad in vivo de las proteínas de fusión fotoconvertibles en función de la desintegración de la señal fluorescente a lo largo del tiempo. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en los campos de la biología celular y del desarrollo.