Medición de pH Fagosoma por Ratiometric microscopía de fluorescencia

El objetivo general de este conjunto de experimentos es medir el pH somal facosomal en células vivas mediante microscopía de fluorescencia métrica proporcional. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología de los fagocitos, como la identificación de moléculas clave en las interacciones de patógenos o el efecto de la disrupción genética o los fármacos en la fagocitosis. La principal ventaja de esta técnica es que, a diferencia de los métodos basados en la población, como los hechos o la espectroscopia, se pueden detectar efectos como los cambios en la migración de la unión de las partículas o en la heterogeneidad de los fagosomas individuales.

Las implicaciones de esta técnica se extienden a nuestras terapias contra organismos químicos patógenos, ya que muchos de estos microorganismos pueden alterar el pH frágil para evitar distracciones dentro de los fagosomas. Para comenzar este procedimiento, agregue 20 miligramos de Xan seco a 10 mililitros de vórtice PBS estéril y caliente en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos. Luego enfriar y centrifugar a 2000 Gs durante cinco minutos.