Name: Desarrollo de una tira de prueba inmunocromatográfica basada en el oro coloidal para la detección de Cetáceos mioglobina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 48 s
Description: Aprende a desarrollar una tira de prueba inmunocromatográfica con oro coloidal para detectar mioglobina de cetáceos. Este método permite un cribado rápido en campo para prevenir el comercio ilegal de carne de ballena con alta especificidad.

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Agradecemos a los colegas de la Sociedad de Cetáceos de Taiwán, el Centro de Investigación de Biología Marina y Cetáceos de la Universidad Nacional Cheng Kung, el Parque Oceánico Farglory y el Centro de Diagnóstico de Enfermedades Animales de la Universidad Nacional de Chiayi por la recolección de muestras. Este proyecto fue financiado por una subvención del Consejo de Agricultura de Taiwán (100AS-02.1-FB99) a WCY.

<ol><li>Robards, M. D., Reeves, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+global+extent+and+character+of+marine+mammal+consumption+by+humans%3A+1970-2009%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Conserv%22%5BJournal%5D)">The global extent and character of marine mammal consumption by humans: 1970-2009.</a> Biol. Conserv. 144, 2770-2786 (2011).</li>
<li>Booth, S., Zeller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mercury%2C+food+webs%2C+and+marine+mammals%3A+implications+of+diet+and+climate+change+for+human+health%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Mercury, food webs, and marine mammals: implications of diet and climate change for human health.</a> Environ. Health Perspect. 113, 521-526 (2005).</li>
<li>Endo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Total+mercury%2C+methyl+mercury%2C+and+selenium+levels+in+the+red+meat+of+small+cetaceans+sold+for+human+consumption+in+Japan%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Total mercury, methyl mercury, and selenium levels in the red meat of small cetaceans sold for human consumption in Japan.</a> Environ. Sci. Technol. 39, 5703-5708 (2005).</li>
<li>Tryland, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+pathogens+in+marine+mammal+meat%5BTitle%5D)+AND+%22Norwegian+Scientific+Committee+for+Food+Safety+%28VKM%29%22%5BJournal%5D)">Human pathogens in marine mammal meat.</a> Norwegian Scientific Committee for Food Safety (VKM). , (2011).</li>
<li>Matsunaga, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quick+and+simple+method+for+the+identification+of+meat+species+and+meat+products+by+PCR+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Meat+Sci%22%5BJournal%5D)">A quick and simple method for the identification of meat species and meat products by PCR assay.</a> Meat Sci. 51, 143-148 (1999).</li>
<li>Dalebout, M. L., Helden, A. V., van Waerebeek, K., Baker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+genetic+identification+of+southern+hemisphere+beaked+whales+%28Cetacea%3A+Ziphiidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ecol%22%5BJournal%5D)">Molecular genetic identification of southern hemisphere beaked whales (Cetacea: Ziphiidae).</a> Mol. Ecol. 7, 687-694 (1998).</li>
<li>Dalmasso, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multiplex+PCR+assay+for+the+identification+of+animal+species+in+feedstuffs%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Probes%22%5BJournal%5D)">A multiplex PCR assay for the identification of animal species in feedstuffs.</a> Mol. Cell. Probes. 18, 81-87 (2004).</li>
<li>Kesmen, Z., Sahin, F., Yetim, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PCR+assay+for+the+identification+of+animal+species+in+cooked+sausages%5BTitle%5D)+AND+%22Meat+Sci%22%5BJournal%5D)">PCR assay for the identification of animal species in cooked sausages.</a> Meat Sci. 77, 649-653 (2007).</li>
<li>Liu, L., Chen, F. -C., Dorsey, J. L., Hsieh, Y. -H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+Monoclonal+Antibody-based+Sandwich+ELISA+for+the+Detection+of+Porcine+Skeletal+Muscle+in+Meat+and+Feed+Products%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Sci%22%5BJournal%5D)">Sensitive Monoclonal Antibody-based Sandwich ELISA for the Detection of Porcine Skeletal Muscle in Meat and Feed Products.</a> J. Food Sci. 71, 1-6 (2006).</li>
<li>Kotoura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Sandwich+ELISA+for+the+Determination+of+Beef+Meat+Content+in+Processed+Foods%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Sci.+Techno.+Res%22%5BJournal%5D)">A Sandwich ELISA for the Determination of Beef Meat Content in Processed Foods.</a> Food Sci. Techno. Res. 15, 613-618 (2009).</li>
<li>Hsieh, Y. H., Chen, Y. T., Gajewski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monoclonal+antibody-based+sandwich+ELISA+for+reliable+identification+of+imported+Pangasius+catfish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Sci%22%5BJournal%5D)">Monoclonal antibody-based sandwich ELISA for reliable identification of imported Pangasius catfish.</a> J. Food Sci. 74, 602-607 (2009).</li>
<li>Ross, H. A., et al. DNA surveillance: web-based molecular identification of whales, dolphins, and porpoises. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRoss%2C+HA+%22J.Hered%22">J.Hered</a>. 94, 111-114 (2003).</li>
<li>Ngom, B., Guo, Y., Wang, X., Bi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+application+of+lateral+flow+test+strip+technology+for+detection+of+infectious+agents+and+chemical+contaminants%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Bioanal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Development and application of lateral flow test strip technology for detection of infectious agents and chemical contaminants: a review.</a> Anal. Bioanal. Chem. 397, 1113-1135 (2010).</li>
<li>Muldoon, M. T., Onisk, D. V., Brown, M. C., Stave, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targets+and+methods+for+the+detection+of+processed+animal+proteins+in+animal+feedstuffs%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Food+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Targets and methods for the detection of processed animal proteins in animal feedstuffs.</a> Int. J. Food Sci. Technol. 39, 851-861 (2004).</li>
<li>Rao, Q., Hsieh, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+commercial+lateral+flow+feed+test+for+rapid+detection+of+beef+and+sheep+content+in+raw+and+cooked+meats%5BTitle%5D)+AND+%22Meat+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a commercial lateral flow feed test for rapid detection of beef and sheep content in raw and cooked meats.</a> Meat Sci. 76, 489-494 (2007).</li>
<li>Tamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MEGA5%3A+molecular+evolutionary+genetics+analysis+using+maximum+likelihood%2C+evolutionary+distance%2C+and+maximum+parsimony+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biol.+Evol%22%5BJournal%5D)">MEGA5: molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods.</a> Mol. Biol. Evol. 28, 2731-2739 (2011).</li>
<li>Atassi, M. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antigenic+structure+of+myoglobin%3A+the+complete+immunochemical+anatomy+of+a+protein+and+conclusions+relating+to+antigenic+structures+of+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Immunochemistry%22%5BJournal%5D)">Antigenic structure of myoglobin: the complete immunochemical anatomy of a protein and conclusions relating to antigenic structures of proteins.</a> Immunochemistry. 12, 423-438 (1975).</li>
<li>Zhang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybridoma+technology+for+the+generation+of+monoclonal+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Hybridoma technology for the generation of monoclonal antibodies.</a> Methods Mol. Biol. 901, 117-135 (2012).</li>
<li>Kao, D. J., Hodges, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantages+of+a+synthetic+peptide+immunogen+over+a+protein+immunogen+in+the+development+of+an+anti-pilus+vaccine+for+Pseudomonas+aeruginosa%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Biol.+Drug+Des%22%5BJournal%5D)">Advantages of a synthetic peptide immunogen over a protein immunogen in the development of an anti-pilus vaccine for Pseudomonas aeruginosa.</a> Chem. Biol. Drug Des. 74, 33-42 (2009).</li>
<li>Dolar, M. L., Suarez, P., Ponganis, P. J., Kooyman, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myoglobin+in+pelagic+small+cetaceans%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Myoglobin in pelagic small cetaceans.</a> J. Exp. Biol. 202, 227-236 (1999).</li>
<li>Lo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+immune+colloidal+gold+strip+for+cetacean+meat+restraining+illegal+trade+and+consumption%3A+implications+for+conservation+and+public+health%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Rapid immune colloidal gold strip for cetacean meat restraining illegal trade and consumption: implications for conservation and public health.</a> PLoS ONE. 8, e60704(2013).</li>
</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

El uso de un péptido sintético conjugado con la proteína portadora es notablemente más eficaz en comparación con su proteína afín. Para una técnica basada en sándwich, debido a que el MAB se desarrolla utilizando epítopos con ubicaciones relativas conocidas, los dos anticuerpos monoclonales en este estudio no pueden interferir con la interacción de cada uno con el epítopo del antígeno diana. Además, la reactividad entre la proteína nativa y el anticuerpo de ratones inmunizados con el conjugado de péptido sintético puede...

Históricamente, la carne de cetáceo se ha consumido en muchas partes del mundo y este consumo continúa hoy en día1. Debido al nivel trófico de los cetáceos, se sabe que hay altos niveles de mercurio y otras toxinas en su carne2. Por lo tanto, el consumo de carne de cetáceo podría generar un problema de salud no solo para los grupos de alto riesgo, como las mujeres embarazadas, sino también para la población en general3. Además, la contaminación de la carne de cetáceo con patógenos zoonóticos o potencialmente zoonóticos también puede ocurrir durante su procesamiento y almacenamiento4. Es difícil, incluso para los agentes experimentados, identificar las carnes de cetáceos solo por su apariencia. Por lo tanto, se requiere un método científico confiable de identificación para diferenciar la carne de cetáceo de otras carnes. Esto ayudaría a limitar el consumo de carne de cetáceo.
Los métodos actuales de identificación de especies incluyen técnicas moleculares y métodos inmunológicos. Las técnicas moleculares, como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y la secuenciación del ADN, pueden utilizarse para identificar muestras no solo de carne cruda5 y muestras descompuestas6, sino también de alimentos procesados como salchichas cocidas y piensos7,8. Los métodos inmunológicos, como el ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA), se aplican comúnmente en la producción de alimentos para detectar el contenido de carne de, por ejemplo, cerdo9, carne de res10 y bagre11. El análisis de ADN basado en PCR para la identificación de carne de cetáceoestá disponible 12 y ha ayudado a prevenir el comercio internacional ilegal de carne de cetáceo en Japón, Corea del Sur, Filipinas, Taiwán, Hong Kong, Rusia, Noruega y Estados Unidos1. Estos métodos son efectivos y confiables, pero pueden tardar horas o días en completarse e implicar pasos laboriosos. La identificación de las carnes de cetáceos suele basarse en técnicas moleculares y actualmente no se dispone de ningún método inmunológico. Para las agencias reguladoras, es muy deseable desarrollar una técnica confiable y rápida que pueda usarse en el campo para identificar carnes de cetáceos. 
Las tiras inmunocromatográficas se utilizan como herramientas de detección con la ventaja de producir resultados rápidos a través de un protocolo simple que es adecuado para su uso en el campo. Los principios de la tira inmunocromatográfica y el ELISA son muy similares, e incluyen anticuerpos, antígenos y marcadores. En el desarrollo de las tiras inmunocromatográficas se han utilizado muchas etiquetas diferentes, como el oro coloidal, el carbono y el látex. En la actualidad, este método es comúnmente utilizado para la detección de antibióticos, toxinas, bacterias y virus13, pero raramente se utiliza para la identificación de proteínas en la carne14,15. En este trabajo proponemos un inmunoensayo enzimático cromatográfico de flujo lateral para la detección rápida de mioglobina (Mb) de cetáceos.

<table><tbody><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato</td><td>AMRESCO</td><td>J373</td><td></td></tr><tr><td>Proteína G HP SpinTrap&nbsp;</td><td>GE&nbsp; Healthcare</td><td>28-9031-34 Columna de</td><td>centrifugación que contiene proteína G Sepharose</td></tr><tr><td>IsoStrip Kit de isotipado de anticuerpos monoclonales</td><td>de ratón Roche</td><td>11493027001</td><td>Tiras de isotipado, prerrecubiertas con anticuerpos anti-Ig de ratón específicos de subclases y cadenas ligeras</td></tr><tr><td>Mini Trans-Blot</td><td>Bio-Rad</td><td>170-3935</td><td></td></tr><tr><td>Membrana de nitrocelulosa</td><td>Anticuerpo Whatman</td><td>Z613630</td><td></td></tr><tr><td> solución de bloqueo&nbsp;</td><td>LTK BioLaboratories</td><td></td><td>Para minimizar las interacciones de unión inespecíficas de IgG inespecífica en las muestras</td></tr><tr><td>de sustrato de fosfatasa BCIP/NBT&nbsp;</td><td>KPL</td><td>50-81-00</td><td></td></tr><tr><td>Detector de proteínas HRP Microwell Kit, Anti-Ratón</td><td>KPL</td><td>54-62-18</td><td></td></tr><tr><td>Nunc Immunoplate MaxiSorp Placa ELISA</td><td>Thermo&nbsp; Fisher Scientific</td><td>EW-01928-08</td><td></td></tr><tr><td>Multiskan&nbsp; Lector EX ELISA&nbsp;</td><td>Termo&nbsp; Electrón&nbsp; Corporation</td><td>51118170</td><td></td></tr><tr><td>Solución de oro coloidal (40 nm)&nbsp;</td><td>REGA biotecnología Inc.</td><td></td><td>40-50 nm es apropiado para immunostrip</td></tr>, <tr><td>albúmina sérica bovina,</td><td>Gibco</td><td>15561-020</td><td></td></tr><tr><td>Impresora de prueba rápida immno-strip</td>, <td>REGA biotechnology Inc.</td><td>AGISMART RP-1000&nbsp;</td><td>Solo apto para la producción a pequeña escala de inmunotiras con fines de investigación y desarrollo</td></tr><tr><td>Componentes de la tira (membranas NC, almohadillas de muestra (vidrio #33, S& S), almohadillas conjugadas (#16S, S& S) y almohadillas absorbentes (CF6, Whatman))</td><td>REGA biotechnology Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Freund' s adyuvante e incompleto Freund' s adyuvante&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F5881, F5506</td><td>Se utiliza para producir emulsiones de agua en aceite de inmunógenos</td></tr><tr><td>Acrilamida, tampón de gel, persulfato de amonio (APS), tetrametiletilendiamina (TEMED)&nbsp;</td><td>Protech</td><td></td><td>Preparación de gel para SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Coomassie azul brillante R-250</td><td>Bio-Rad</td><td>1610436</td><td>Tinción de proteínas en geles SDS-PAGE</td></tr><tr>,<td>tampón de muestra Laemmli y &beta;-mercaptoetanol</td><td>Bio-Rad</td><td>1610737, 1610710</td><td>Diluir muestras de proteínas antes de cargarlas en geles SDS-PAGE</td></tr></tbody></table>

desarrollo de una tira de prueba inmunocromatográfica basada en el oro coloidal para la detección de cetáceos mioglobina

Development of a Colloidal Gold-based Immunochromatographic Test Strip for Detection of Cetacean Myoglobin

Este protocolo describe el desarrollo de una tira reactiva inmunocromatográfica de oro coloidal basada en el formato sándwich que se puede utilizar para diferenciar la mioglobina (Mb) de los cetáceos de la de las focas y otros animales. La franja permite un cribado rápido y sobre el terreno de la carne de cetáceos, restringiendo así su comercio y consumo ilegales. Se desarrollaron dos anticuerpos monoclonales (mAb) con reactividad frente al Mb de cetáceos. Se analizaron las secuencias de aminoácidos de las regiones reactivas antigénicas Mb de varios animales con el fin de diseñar dos péptidos sintéticos (un péptido general y un péptido específico) y posteriormente elevar los mAbs (subclase IgG1). Los mAbs se seleccionaron a partir de hibridomas cribados por ELISA indirecto, Western blot y dot blot. CGF5H9 fue específico para los Mbs de conejos, perros, cerdos, vacas, cabras y cetáceos, mientras que mostró una afinidad débil o nula con los Mbs de pollos, atunes y focas. CSF1H13 pueden atar a focas y cetáceos con fuerte afinidad, pero no mostraron afinidad con otros animales. En este estudio se utilizaron muestras de cetáceos de cuatro familias (Balaenopteridae, Delphinidae, Phocoenidae y Kogiidae), y los resultados indicaron que estos dos mAbs tienen una amplia capacidad de unión a Mbs de diferentes cetáceos. Estos mAbs se aplicaron en una tira reactiva inmunocromatográfica de oro coloidal tipo sándwich. CGF5H9, que reconoce muchas especies, fue marcado con oro coloidal y se utilizó como anticuerpo de detección. CSF1H13, que se recubrió en la zona de ensayo, detectó la presencia de cetáceos y focas Mbs. Se analizaron por triplicado muestras de músculo de atún, pollo, foca, cinco especies de mamíferos terrestres y 15 especies de cetáceos. Todas las muestras de cetáceos mostraron resultados positivos y todas las demás muestras mostraron resultados negativos.

Características de anticuerpos monoclonales Hemos desarrollado dos IgG 1 mAb (CGF5H9 y CSF1H13) que reconocen dos péptidos sintéticos (MKASEDLKKHGNTVLC y AIIHVLHSRHPAEFGC), respectivamente, de los cetáceos Mb, y éstos se utilizaron para construir una tira de prueba inmunocromatográfica de oro coloidal de tipo sándwich para la detección rápida de Mb de cetáceos. Figura 2 muestra que CGF5H9 detecta cetáceos y otros mamíferos como una sola banda teñi...

Este protocolo describe el desarrollo de dos anticuerpos monoclonales (mAb) de clase IgG fuertemente reactivos a la mioglobina de los cetáceos. Estos mAbs se aplican en una tira reactiva inmunocromatográfica de oro coloidal basada en el formato sándwich para diferenciar el Mb de los cetáceos de la foca y otros animales.

Desarrollo de una tira de prueba inmunocromatográfica basada en el oro coloidal para la detección de Cetáceos mioglobina

This protocol describes the development of a colloidal gold immunochromatographic test strip based on the sandwich format that can be used to ...

El objetivo general de esta tira de prueba inmunocromatográfica con oro coloidal es diferenciar la mioglobina de los cetáceos de la de las focas y otros animales. Este método puede proporcionar un tamizaje rápido y en el lugar para la carne de cetáceo, restringiendo así su comercio y consumo ilegales. La principal ventaja de esta técnica es que un resultado exitoso puede observarse directamente entre cinco y diez minutos después de homogeneizar 0,3 gramos de músculo, con una especificidad y sensibilidad notables.Por lo tanto, este método puede proporcionar una detección rápida de carne de cetáceo en el campo. También puede aplicarse a otras carnes, como carne de caballo o de cerdo. Para diseñar péptidos sintéticos destinados a generar anticuerpos monoclonales con reactividad frente a la mioglobina de cetáceos, se analizan las secuencias de aminoácidos de las regiones antigénicas reactivas de la mioglobina de diversos animales.Comience recuperando de GenBank las secuencias de aminoácidos de mioglobina de atún, pollo, avestruz, mamíferos domésticos, foca y 18 especies de cetáceos. A continuación, alinee las secuencias utilizando el software adecuado. Inicie el Explorador de Alineamie

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