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DOI: 10.3791/53797-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Los cultivos de baja densidad de neuronas primarias del hipocampo generalmente requieren una capa alimentadora de glía para suministrar factores neurotróficos y mantener la longevidad. Describimos aquí un método simplificado para cultivar neuronas de ultra baja densidad en cubreobjetos de vidrio en presencia de una capa alimentadora de neuronas de alta densidad, lo que facilita la investigación de mecanismos neuronal-autónomos específicos.
El objetivo general de este procedimiento es establecer cultivos sanos a largo plazo de neuronas primarias del hipocampo de ratón a ultra baja densidad, con el fin de facilitar el marcaje inmunocitoquímico y el estudio de los mecanismos autónomos de las células neuronales. Este estudio puede ayudar a comprender algunas cuestiones clave en el campo de la investigación en neurociencia, como los estudios sobre la especificidad de las proteínas en la neuromorfología de la función del desarrollo. La principal ventaja de esta técnica es que permite que las neuronas crezcan a una densidad ultra baja en un cubreobjetos sin el apoyo de una capa alimentadora glial.
La demostradora del procedimiento estará a cargo de Mariel Piechowicz, una alumna de mi laboratorio. Prepare dos placas de 24 pocillos de alta densidad y dos de baja densidad. Con una aguja de calibre 28, grabe el fondo de las placas de 24 pocillos, de modo que los plásticos desplazados actúen como soporte para los cubreobjetos con neuronas de baja densidad que crecen en ellos.
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