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JoVE Journal Neuroscience
Quadruple Immunostaining of the Olfactory Bulb for Visualization of Olfactory Sensory Axon Molecular Identity Codes

Imunocoloración Cuádruple del Bulbo Olfativo para la Visualización de Códigos de Identidad Molecular del Axón Sensorial Olfativo

Full Text
7,622 Views
06:32 min
June 5, 2017

DOI: 10.3791/55893-v

Naoki Ihara1, Yuji Ikegaya1,2, Haruki Takeuchi1,3

1Laboratory of Chemical Pharmacology, Graduate School of Pharmaceutical Sciences,The University of Tokyo, 2Center for Information and Neural Networks,National Institute of Information and Communications Technology, 3PRESTO,Japan Science and Technology Agency (JST)

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Las neuronas sensoriales olfativas expresan una amplia variedad de moléculas de clasificación de axones para establecer circuitos neurales adecuados. Este protocolo describe un método de tinción inmunohistoquímica para visualizar las expresiones combinatorias de las moléculas de clasificación de axones en los terminales axónicos de las neuronas sensoriales olfatorias.

El objetivo general de este método de tinción inmunohistoquímica es visualizar la expresión combinada de las moléculas de clasificación de axones en el extremo axónico de las neuronas sensoriales olfativas. Este método puede ayudar a caracterizar procesos clave en el campo del desarrollo olfativo, como la guía de los axones, la formación de sinapsis y la regeneración de las neuronas sensoriales olfativas. La principal ventaja de esta técnica es que permite a los científicos comparar y analizar los patrones de expresión de las moléculas de clasificación de axones en el bulbo olfatorio sin mantener variación entre secciones.

La demostración visual de este método es fundamental, ya que el paso de inclusión es difícil de aprender, porque la posición y el ángulo de la muestra de tejidos olfativos en el molde son difíciles de describir con palabras. Comience con cabezas de ratones de una a dos semanas de edad que se hayan fijado mediante perfusión intracardíaca de paraformaldehído al 4%. Inserte una hoja de tijera en el espacio entre los dientes superiores e inferiores, y corte horizontalmente para quitar la mandíbula inferior.

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