Sistemas inducibles y constitutivos para la modificación genética In Vivo de hepatocitos de ratón mediante la inyección en la vena hidrodinámica cola

El objetivo general de este método es la transfección estable de hepatocitos in vivo, con construcciones vectoriales para la expresión de genes inducibles o shRNA. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la investigación del hígado. Por ejemplo, se puede aplicar para investigar los mecanismos del cáncer de hígado y su regeneración.

La principal ventaja de esta técnica es la expresión combinada de CreER junto con una expresión de shRNA transgén R inducible en hepatocitos de ratón in vivo, lograda por inyección hidrodinámica en la vena de cola. La demostración del procedimiento estará a cargo de Eric Hubner, un estudiante de medicina de nuestro laboratorio. Comience combinando 150 nanogramos de vector de entrada que contenga el ARN de horquilla corta para la proteína objetivo con 150 nanogramos de vector pTC Tet y tampón TE hasta un volumen total de ocho microlitros.