Diferenciación neuronal eficiente utilizando el cultivo monocelular de células madre embrionarias humanas

Las células madre embrionarias humanas se pueden inducir a diferenciarse en células progenitoras neuronales y posteriormente en astrocito de neurona y oligodendrocitos. Sin embargo, el método de cultivo tipo para las células madre embrionarias humanas y su diferenciación en células progenitoras neuronales son un sistema de co-cultivo in vivo muy ineficiente y abierto Aquí presentamos un sistema de cultivo mejorado y robusto que es fácilmente escalable utilizando el cultivo de tipo de célula única de alta densidad con células madre embrionarias humanas. El cultivo de tipo celular único de células madre embrionarias humanas proporciona un sistema rápido y eficiente para estudiar los mecanismos moleculares que regulan la diferenciación de varios pasos a lo largo de diversos y distintos linajes diferenciados, incluidas las células progenitoras neuronales y su posterior diferenciación en linajes neuronales adicionales.

Comience preparando placas recubiertas de matriz de membrana de sótano calificadas con células madre embrionarias humanas. Descongelar lentamente la solución de matriz de membrana del sótano a cuatro grados centígrados durante al menos dos o tres horas o durante la noche. Cuando se descongele, diluya la matriz en frío DMEM/F-12 a 2% mezcle bien, y cubra cada pozo de una placa de seis pozos con un mililitro de la solución diluida.