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DOI: 10.3791/61713-v
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This study presents a protocol for simultaneous live imaging of multiple specimens using light sheet-based fluorescence microscopy, addressing issues of ambient variance in developmental biology. By utilizing a cobweb holder for stacking embryos, the method enhances the efficacy of imaging while minimizing inconsistencies.
La microscopía de fluorescencia basada en láminas de luz es la herramienta más valiosa en biología del desarrollo. Un problema importante en los estudios comparativos es la varianza ambiental. Nuestro protocolo describe un marco experimental para la proyección de imagen viva simultánea de especímenes múltiples y, por lo tanto, trata este problema favorablemente activamente.
Los microscopios de fluorescencia de hoja de luz basados en cámara de muestra están diseñados para un alto contenido en lugar de un alto rendimiento. Por lo tanto, los ensayos de imagen en vivo deben realizarse secuencialmente y, por lo tanto, deben verse menos afectados por la variación ambiental. Nuestro soporte de telaraña permite el apilamiento y la obtención simultánea de imágenes de múltiples embriones, eliminando la variación ambiental y aumentando el rendimiento.
El montaje de embriones en el soporte de telarañas requiere cierta delicadeza. Un vídeo explicativo es ideal para ilustrar la secuencia de los numerosos gestos cortos de conducta. Para la calibración del microscopio de fluorescencia basado en cámara de muestras de lámina de luz.
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