Evaluación de la actividad de reparación de roturas de doble cadena de ADN mediante ensayos reporteros cuantitativos y de alto rendimiento basados en luminiscencia

Artios está desarrollando nuevos medicamentos contra el cáncer dirigidos a la respuesta al daño del ADN. Para hacer esto posible, desarrollamos una serie de ensayos novedosos para medir la actividad de reparación del ADN celular. Estos ensayos tuvieron un gran impacto en nuestros programas, lo que llevó a que los activos en etapa clínica se probaran en pacientes con grandes necesidades médicas insatisfechas.

La medición precisa de la actividad celular en el objetivo es esencial para el progreso de nuevas terapias dirigidas. La generación de ensayos para factores de reparación del ADN con las propiedades necesarias para impulsar una campaña eficiente de descubrimiento de fármacos ha sido un desafío, ya sea por la necesidad de un alto rendimiento, una relación señal-ruido robusta, una respuesta rápida e, idealmente, la portabilidad a diferentes sistemas biológicos. Hemos desarrollado un conjunto de ensayos reporteros robustos, cuantitativos y titulables basados en luminiscencia para medir la competencia de cuatro vías principales de reparación de roturas de doble cadena, la recombinación homóloga, la unión de extremos no homólogos, la unión de extremos mediada por microhomología y el recocido de cadena única.

Estos ensayos reporteros se validan como lectura de la reparación dependiente de la vía, son sensibles a la modulación farmacológica y tienen un tiempo de respuesta rápido. Los sustratos de reparación que hemos desarrollado son extracromosómicos, por lo que pueden transfectarse transitoriamente en modelos de interés y escalarse fácilmente a un formato de alto rendimiento. Creemos que nuestros sistemas de ensayo tienen un papel importante en el descubrimiento de fármacos DDR, pero también en la mejora de nuestra comprensión de la biología DDR en general.

En este sentido, esperamos que los métodos ayuden a acelerar la identificación y el enjuiciamiento de nuevos objetivos farmacológicos, lo que conducirá a medicamentos para enfermedades como el cáncer en las que hay una gran necesidad médica insatisfecha.