Utilisation de l’imagerie en direct ex vivo pour étudier les divisions et les mouvements cellulaires au cours du renouvellement dentaire de la souris

Abinaya Sundari Thooyamani; Elias Shahin; Sanako Takano; Amnon Sharir; Jimmy  K. Hu

doi:10.3791/66020

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Article de méthode

Utilisation de l’imagerie en direct ex vivo pour étudier les divisions et les mouvements cellulaires au cours du renouvellement dentaire de la souris

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DOI :

10.3791/66020

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27 octobre 2023

Abinaya Sundari Thooyamani^*¹ , Elias Shahin^*² , Sanako Takano¹ , Amnon Sharir² , Jimmy K. Hu¹^,³

¹School of Dentistry, University of California Los Angeles, ²The Institute of Biomedical and Oral Research, Faculty of Dental Medicine, Hebrew University of Jerusalem, ³Molecular Biology Institute, University of California Los Angeles

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

L’imagerie en direct ex vivo est une technique puissante pour étudier les processus dynamiques des mouvements et des interactions cellulaires dans les tissus vivants. Nous présentons ici un protocole qui met en œuvre la microscopie à deux photons pour suivre en direct les cellules épithéliales dentaires dans des incisives de souris adultes entières en culture.

Résumé

L’incisive de souris, qui ne cesse de croître, est en train de devenir un système modèle très facile à traiter pour étudier la régulation des cellules souches épithéliales et mésenchymateuses adultes et la régénération des dents. Ces populations progénitrices se divisent, se déplacent et se différencient activement pour maintenir l’homéostasie tissulaire et régénérer les cellules perdues de manière réactive. Cependant, les analyses traditionnelles utilisant des coupes de tissus fixes n’ont pas pu capturer les processus dynamiques des mouvements et des interactions cellulaires, ce qui limite notre capacité à étudier leurs régulations. Cet article décrit un protocole permettant de maintenir des incisives de souris entières dans un système de culture d’explants et de suivre en direct des cellules épithéliales dentaires à l’aide de la microscopie timelapse multiphotonique. Cette technique s’ajoute à notre boîte à outils existante pour la recherche dentaire et permet aux chercheurs d’acquérir des informations spatio-temporelles sur les comportements et les organisations cellulaires dans un tissu vivant. Nous prévoyons que cette méthodologie aidera les chercheurs à explorer davantage les mécanismes qui contrôlent les processus cellulaires dynamiques qui se déroulent à la fois pendant le renouvellement et la régénération dentaires.

Introduction

Au cours des deux dernières décennies, l’incisive de souris s’est imposée comme une plate-forme inestimable pour étudier les principes de la régulation des cellules souches adultes et de la régénération des dents ^1,2. L’incisive de la souris grandit continuellement et se renouvelle tout au long de la vie de l’animal. Pour ce faire, il maintient à la fois les cellules souches épithéliales et mésenchymateuses, qui peuvent s’auto-renouveler et se différencier en différents types de cellules de la dent ^1,2. Alors que les cellules souches épithéliales denta....