Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 5:05 min • April 30th, 2023
- Pour commencer le test, commencez par pipeter une suspension de cellules de fibroblastes complétée par de l’acide ascorbique dans une plaque à puits et incuber. L’acide ascorbique augmente la prolifération des fibroblastes. Il stimule également la sécrétion de composants ECM natifs, intégrant ainsi les cellules proliférantes dans l’épaisse matrice extracellulaire.
Libérez doucement la matrice de la surface de la plaque et laissez-la flotter dans le support. La matrice se contracte et s’épaissit avec plus de dépôt et de remodelage de la matrice, donnant naissance à un tissu ressemblant au derme natif. Étalez la matrice sur un maillage poreux. Ensuite, ensemencez les cellules cancéreuses épithéliales sur la matrice et incubez pour que les cellules se stabilisent et se fixent.
Transférez l’ensemble sur une plate-forme grillagée pré-assemblée dans un plat. Ajoutez un média pour compléter uniquement la couche inférieure de la matrice afin de générer une interface air-liquide pour les cellules situées au-dessus. Pendant la culture, l’interface favorise la prolifération et la différenciation des cellules tumorales. Les cellules sécrètent également des protéases qui dégradent l’ECM, faci
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