Analyse microscopique de la croissance bactérienne sous stress à l’aide de chambres microfluidiques

Commencez avec une plaque microfluidique remplie d’un milieu nutritif préchauffé.

Fixez la plaque au système de collecteur et scellez la configuration. Faites passer le fluide à travers les canaux pour éliminer les bulles d’air.

Placez l’installation sur une platine de microscope et préchauffez-la pour éviter l’expansion de la plaque pendant l’imagerie.

Ensuite, retirez le milieu, introduisez une culture bactérienne dans les entrées des cellules et un milieu induisant du stress dans les entrées de solution.

Le milieu induisant le stress contient un antibiotique qui arrête la division cellulaire sans inhiber une augmentation de la masse cellulaire.

Scellez le système, puis lancez le chargement des cellules pour transférer les bactéries dans la chambre de culture de la plaque.

À l’aide de la lumière transmise, localisez un champ de vision contenant des cellules individuelles uniformément réparties.

Injectez dans la chambre le milieu induisant le stress pour exposer les cellules à l’antibiotique.

À l’aide du mode de contraste de phase, capturez des images en accéléré pour observer la formation de cellules filamenteuses allongées avec une teneur accrue en ADN causée par l’inhibition de la divi