Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 4:08 min • April 30th, 2023
Les molécules d’adhésion des cellules épithéliales, ou EpCAM, sont des glycoprotéines transmembranaires de surface surexprimées dans les cellules épithéliales à prolifération rapide dans les cancers de la prostate. Pour isoler les cellules exprimant EpCAM, commencez par un fil de qualité médicale portant une pointe fonctionnalisée recouverte d’or. La fonctionnalisation recouvre un gel polymère contenant des anticorps spécifiques à l’EpCAM liés de manière covalente.
Immergez le fil dans une suspension de sang périphérique contenant des cellules cancéreuses marquées par fluorescence. S’assurer que la partie fonctionnalisée reste trempée dans la suspension sanguine. Les EpCAM sur les cellules cancéreuses reconnaissent et se lient à leurs anticorps spécifiques fonctionnalisés sur le fil.
Laver avec un tampon pour éliminer toutes les cellules non liées de la surface du fil. Pliez le fil et montez-le sur une lame de verre contenant un tampon, avec la partie fonctionnalisée immergée dans le tampon. Utilisez un microscope à fluorescence pour vérifier la fluorescence brillante du cytoplasme et des noyaux des cellules et confirmer la présence de cellules capturées sur le fil.
Traitez le fil
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