Échantillonnage de cellules uniques à l’aide de la microdissection par capture laser : une technique pour récolter des cellules cibles d’une population cellulaire hétérogène
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0 vues • 2:30 min • April 30th, 2023
La microdissection par capture laser permet d’obtenir une seule cellule cible à partir d’un mélange de cellules préparé sur une lame de verre. Commencez par prendre une lame de verre appropriée recouverte d’une membrane biochimiquement inerte perméable aux UV sur sa surface. Exposez la lame à la lumière UV pour la rendre plus hydrophile et permettre une meilleure adhérence cellulaire.
Assemblez la lame dans un appareil de cytocentrifugation. Ajoutez la suspension cellulaire sur l’orifice de l’entonnoir de l’appareil. Cytocentrifugeuse pour permettre à la force centrifuge de se concentrer et de déposer une monocouche de cellules sur une petite surface sur la lame de verre. Laissez la diapositive sécher à l’air.
Placez la lame, côté échantillon vers le haut, sous un microscope à microdissection laser. Définissez la région entourant la cellule d’intérêt. Maintenant, concentrez le faisceau laser pour disséquer la région contenant la cellule cible ainsi que le revêtement de la membrane. Ensuite, défocalisez le faisceau laser et pulsez-le pour générer une pression. Cette énergie catapulte la région microdissquée dans le capuchon inversé d’un tube de collecte pré-assemblé contenant un tam
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