Génération de particules semblables au virus Chikungunya à l’aide d’un système d’expression de baculovirus dans des cellules d’insectes

Les

particules semblables au virus Chikungunya, les VLP, sont des structures non infectieuses composées de protéines d’enveloppe virale intégrées dans une bicouche lipidique et dépourvues de matériel génétique.

Pour produire des VLP de Chikungunya, il faut infecter les cellules d’insectes Spodoptera frugiperda Sf9 avec des baculovirus recombinants exprimant une cassette de gènes structuraux du Chikungunya. La cassette est constituée d’un promoteur de baculovirus fusionné avec des gènes structurels du chikungunya codant pour des protéines de capside et d’enveloppe.

Pendant l’incubation, les glycoprotéines de l’enveloppe du baculovirus se lient aux récepteurs de surface des cellules de l’insecte. Cela facilite l’entrée du baculovirus et la libération de l’ADN viral dans le cytoplasme, générant des polyprotéines contenant des protéines de capside et d’enveloppe du chikungunya.

Après la synthèse, le clivage autocatalytique de la protéine de capside produit la polyprotéine précurseur possédant des protéines d’enveloppe dans le réticulum endoplasmique, RE. Dans la lumière du RE, les enzymes clivent la polyprotéine précurseur, générant des protéines individuelles qui pénètrent dans le com