Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:57 min • July 8th, 2025
Commencez avec une plaque multipuits compatible avec la fluorescence contenant une suspension de lymphocytes T dérivés de souris transgéniques.
Ces lymphocytes contiennent une protéine fluorescente verte ou cassette d’expression GFP, contrôlée par l’engagement du récepteur des lymphocytes T ou TCR avec des composés immunomodulateurs.
Traitez bien chaque puits avec une solution contenant des composés immunomodulateurs de potentiels différents.
Pendant l’incubation, les composés immunomodulateurs interagissent avec les TCR des lymphocytes T.
L’interaction du TCR avec un composé stimulant déclenche l’activation de la cassette de gènes, augmentant ainsi l’expression de la GFP.
En revanche, l’interaction du TCR avec un composé inhibiteur inhibe la cassette de gènes et réduit l’expression de la GFP.
Ensuite, superposez les cellules avec un colorant fluorescent d’acide nucléique pour colorer les noyaux.
Centrifuger la plaque pour stabiliser les cellules afin d’obtenir une mesure précise de la fluorescence.
Au microscope à fluorescence, les lymphocytes T viables présentent deux signaux de fluorescence correspondant à des noyaux cellulaires et à des protéines fluorescentes vertes.
La fluore
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