La technique de photoconversion pour explorer la dynamique cellulaire inflammatoire dans les pupes d’insectes
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:44 min • July 8th, 2025
Commencez par une boîte à fond de verre contenant des pupes de drosophile transgéniques portant un épithélium blessé marqué avec leurs protéines de surface cellulaire présentant une fluorescence verte.
Les cellules immunitaires des pupes - ou hémocytes - expriment des fluorophores verts photoconvertibles dans le cytoplasme et des protéines fluorescentes rouges dans le noyau, facilitant le suivi cellulaire.
Les cellules blessées libèrent des chimioattractants – ou molécules inflammatoires, attirant les hémocytes vers le site blessé.
La microscopie confocale révèle la zone blessée encerclée par des cellules épithéliales vertes.
Au cours de la cicatrisation, les hémocytes verts avec des noyaux rouges près de la plaie étendent les protubérances membranaires - filopodes et lamellipodes - et migrent vers la zone blessée.
Au fil du temps, à mesure que le chimioattractant se diffuse, des hémocytes distants migrent vers la plaie, créant une onde cellulaire immunitaire.
Illuminez la sous-population d’hémocytes migrateurs avec une longueur d’onde de 405 nanomètres. Cela convertit de manière irréversible le fluorophore photoconvertible des hémocytes du vert au rouge.
Ces hémocytes photoconvert
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