Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:01 min • July 8th, 2025
Prenez des vers transgéniques Caenorhabditis elegans poussant sur un bloc de gélose.
Ces vers expriment un indicateur de calcium, GCaMP5, et une protéine fluorescente insensible au calcium, mCherry, dans les neurones qui régulent le comportement de ponte.
Montez les vers sur une platine de microscope inversé.
Visualisez la fluorescence de GCaMP5 et mCherry.
Avant la libération de l’ovule, les neurones s’activent, ouvrant des canaux calciques voltage-dépendants, qui permettent l’afflux de calcium.
Le calcium intracellulaire se lie à GCaMP5, modifiant sa conformation et augmentant la fluorescence.
Pendant ce temps, la fluorescence de mCherry reste inchangée, ce qui permet le suivi du neurone.
Les neurones activés libèrent des neurotransmetteurs qui se lient à des récepteurs musculaires spécifiques, déclenchant la libération d’œufs.
Après la libération, les canaux calciques se ferment, réduisant l’afflux de calcium et la fluorescence de GCaMP5.
Ensuite, capturez des images en fond clair pour observer le mouvement des vers.
Une réduction des mouvements se produit en raison de contractions musculaires avant la libération de l’œuf.
Après la libération de l’œuf, les muscles se détendent,
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