Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
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Commençons par une configuration d’électrophysiologie contenant une tranche de cerveau antérieur de souris immergée dans un aCSF oxygéné.
Le LCR contient un inhibiteur des canaux ioniques qui inhibe sélectivement les canaux ioniques sodiques, empêchant ainsi l’excitation neuronale induite par le sodium.
Les neurones corticaux expriment des protéines fluorescentes de détection du glutamate.
Localisez un seul bouton axonal de neurone présynaptique capable de libérer du glutamate, un neurotransmetteur excitateur, au niveau de la synapse, une jonction où il se connecte aux neurones postsynaptiques.
Positionnez une électrode de stimulation près de ce bouton et appliquez des courants dépolarisants.
Cela excite le neurone présynaptique, provoquant un afflux d’ions calcium et facilitant la libération de glutamate.
Démarrez l’enregistrement de l’intensité de fluorescence autour du bouton sélectionné.
Le glutamate libéré interagit avec les protéines capteurs et les récepteurs sur les neurones post-synaptiques.
Pendant ce temps, éclairez la zone sélectionnée avec une lumière laser, provoquant la fluorescence des protéines du capteur liées au glutamate ; une intensité de fluorescence croissant
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