Visualisation et cartographie des voies neuronales dans une tranche de cerveau d’amygdale

Dans le cerveau de la souris, l’amygdale contient des neurones qui forment des connexions synaptiques avec le cortex préfrontal médian, ou neurones mPFC.

Prenez une tranche de cerveau d’amygdale dans laquelle les neurones mPFC expriment un canal sensible à la lumière, la rhodopsine fusionnée à une protéine fluorescente.

Placez la tranche dans une chambre d’enregistrement et visualisez-la au microscope à fluorescence pour localiser les neurones mPFC.

Passez à une vue en fond clair et introduisez une pipette patch contenant une solution interne.

Appliquez une pression positive pour faire avancer la pipette vers un neurone de l’amygdale.

Au contact neuronal, une fossette se forme.

Appliquez une aspiration pour former un joint étanche.

Continuez l’aspiration pour rompre la membrane, en établissant un contact avec l’intérieur de la cellule.

Illuminez la tranche pour activer la canalisation neuronale mPFC, la rhodopsine, déclenchant l’afflux d’ions positifs, la génération de potentiel d’action et la libération de neurotransmetteurs.

Les neurotransmetteurs se lient aux récepteurs neuronaux de l’amygdale postsynaptiques, provoquant un afflux d’ions et une génération de courant.

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