Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:46 min • July 8th, 2025
Prenez une section de tissu cérébral de souris fixe contenant une population clairsemée d’astrocytes exprimant une protéine fluorescente.
Traitez la section flottante avec un tampon contenant un détergent pour perméabiliser les cellules.
Incuber la section dans un tampon de blocage pour empêcher la liaison d’anticorps non spécifiques.
Traitez la section avec des anticorps primaires et incubez pour permettre aux anticorps de se lier aux protéines fluorescentes dans les astrocytes.
Lavez tout excès d’anticorps primaires à l’aide d’un tampon.
Ensuite, incubez la section avec des anticorps secondaires marqués au fluorophore qui se lient aux anticorps primaires.
Lavez les anticorps secondaires non liés à l’aide d’un tampon.
Transférez la section dans un mélange d’eau tampon déminéralisée pour éliminer les résidus de détergent.
Placez la section sur une lame contenant de l’eau déminéralisée tampon. Retirez l’excès de liquide et ajoutez du support de montage. Ensuite, positionnez une lamelle et fixez-la.
Enfin, utilisez la microscopie confocale pour visualiser les astrocytes exprimant des protéines fluorescentes marqués dans la coupe.
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