Name: Dépistage ARNi pour identifier les phénotypes postembryonnaires dans C. elegans /em (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 40 s
Description: Découvrez le criblage ARNi pour identifier les régulateurs postembryonnaires de l'expression protéique chez C. elegans. Cette méthode utilise des protéines marquées par fluorescence et la microscopie pour visualiser les changements de localisation cellulaire.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Les auteurs tiennent à remercier le Dr Rick Padgett (Waksman Institute, l&#39;Université Rutgers, New Jersey) pour le don de la DBL-1 d&#39;ADNc et le Dr Christopher Rongo (Waksman Institute, l&#39;Université Rutgers, New Jersey) pour un marqueur d&#39;injection. Le laboratoire du Dr Barth Grant effectué le bombardement canon à gènes pour l&#39;intégration du nombre de copies bas de la GFP-tagged DBL-1 construit. Le laboratoire de René Garcia fourni une assistance technique lors de la création de texIs100. Le Garcia René, Lints Robyn, et Hongmin Qin laboratoires ont fourni des conseils productifs. Ce travail a été financé par fonds de démarrage du ministère TAMHSC de médecine moléculaire et cellulaire. Le champ d&#39;application composé et confocale disque de rotation ont été achetés avec des fonds fournis par le département et le Collège TAMHSC du Bureau médecine du doyen.

<ol><li>Giacomotto, J., Segalat, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+screening+and+small+animal+models%2C+where+are+we%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">High-throughput screening and small animal models, where are we.</a> Br. J. Pharmacol. 160, 204-216 (2010).</li>
<li>Lamitina, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+genomic+approaches+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Functional genomic approaches in C. elegans.</a> Methods in Molecular Biology. 351, 127-138 (2006).</li>
<li>Boutros, M., Ahringer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+art+and+design+of+genetic+screens%3A+RNA+interference%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Genet%22%5BJournal%5D)">The art and design of genetic screens: RNA interference.</a> Nat. Rev. Genet. 9, 554-566 (2008).</li>
<li>Praitis, V., Casey, E., Collar, D., Austin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creation+of+low-copy+integrated+transgenic+lines+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Creation of low-copy integrated transgenic lines in Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 157, 1217-1226 (2001).</li>
<li>Yandell, M. D., Edgar, L. G., Wood, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trimethylpsoralen+induces+small+deletion+mutations+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Trimethylpsoralen induces small deletion mutations in Caenorhabditis elegans.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91, 1381-1385 (1994).</li>
<li>Frokjaer-Jensen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-copy+insertion+of+transgenes+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Genetics%22%5BJournal%5D)">Single-copy insertion of transgenes in Caenorhabditis elegans.</a> Nature Genetics. 40, 1375-1383 (2008).</li>
<li>Giordano-Santini, R., Dupuy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selectable+genetic+markers+for+nematode+transgenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Mol.+Life.+Sci%22%5BJournal%5D)">Selectable genetic markers for nematode transgenesis.</a> Cell. Mol. Life. Sci. , (2011).</li>
<li>Berkowitz, L. A., Knight, A. L., Caldwell, G. A., Caldwell, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+Stable+Transgenic+C.+elegans+Using+Microinjection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection.</a> J. Vis. Exp. (18), e833(2008).</li>
<li>Mello, C., Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">DNA transformation.</a> Methods in Cell Biology. 48, 451-482 (1995).</li>
<li>Simmer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+the+putative+RNA-directed+RNA+polymerase+RRF-3+makes+C.+elegans+hypersensitive+to+RNAi%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Loss of the putative RNA-directed RNA polymerase RRF-3 makes C. elegans hypersensitive to RNAi.</a> Curr. Biol. 12, 1317-1319 (2002).</li>
<li>Zhuang, J. J., Hunter, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specificity+of+Caenorhabditis+elegans+enhanced+RNAi+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Tissue-specificity of Caenorhabditis elegans enhanced RNAi mutants.</a> Genetics. , (2011).</li>
<li>Samuelson, A. V., Klimczak, R. R., Thompson, D. B., Carr, C. E., Ruvkun, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+Caenorhabditis+elegans+genes+regulating+longevity+using+enhanced+RNAi-sensitive+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Symposia+on+Quantitative+Biology%22%5BJournal%5D)">Identification of Caenorhabditis elegans genes regulating longevity using enhanced RNAi-sensitive strains.</a> Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology. 72, 489-497 (2007).</li>
<li>Wang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Somatic+misexpression+of+germline+P+granules+and+enhanced+RNA+interference+in+retinoblastoma+pathway+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Somatic misexpression of germline P granules and enhanced RNA interference in retinoblastoma pathway mutants.</a> Nature. 436, 593-597 (2005).</li>
<li>Fraser, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+genomic+analysis+of+C.+elegans+chromosome+I+by+systematic+RNA+interference%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Functional genomic analysis of C. elegans chromosome I by systematic RNA interference.</a> Nature. 408, 325-330 (2000).</li>
<li>Kamath, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+functional+analysis+of+the+Caenorhabditis+elegans+genome+using+RNAi%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Systematic functional analysis of the Caenorhabditis elegans genome using RNAi.</a> Nature. 421, 231-237 (2003).</li>
<li>Peters, K., McDowall, J., Rose, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+in+the+bli-4+%28I%29+locus+of+Caenorhabditis+elegans+disrupt+both+adult+cuticle+and+early+larval+development%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Mutations in the bli-4 (I) locus of Caenorhabditis elegans disrupt both adult cuticle and early larval development.</a> Genetics. , 129-195 (1991).</li>
<li>Thacker, C., Peters, K., Srayko, M., Rose, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bli-4+locus+of+Caenorhabditis+elegans+encodes+structurally+distinct+kex2%2Fsubtilisin-like+endoproteases+essential+for+early+development+and+adult+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+%26+Development%22%5BJournal%5D)">The bli-4 locus of Caenorhabditis elegans encodes structurally distinct kex2/subtilisin-like endoproteases essential for early development and adult morphology.</a> Genes & Development. 9, 956-971 (1995).</li>
<li>Byerly, L., Cassada, R. C., Russell, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+life+cycle+of+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.+I.+Wild-type+growth+and+reproduction%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The life cycle of the nematode Caenorhabditis elegans. I. Wild-type growth and reproduction.</a> Dev. Biol. 51, 23-33 (1976).</li>
<li>Stiernagle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22WormBook%22%5BJournal%5D)">Maintenance of C. elegans.</a> WormBook. , 1-11 (2006).</li>
<li>Savage-Dunn, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+screen+for+small+body+size+mutants+in+C.+elegans+reveals+many+TGFbeta+pathway+components%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">Genetic screen for small body size mutants in C. elegans reveals many TGFbeta pathway components.</a> Genesis. 35, 239-247 (2003).</li>
<li>Qu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+analysis+of+the+Ahringer+Caenorhabditis+elegans+RNAi+feeding+library%3A+a+guide+for+genome-wide+screens%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Reliability analysis of the Ahringer Caenorhabditis elegans RNAi feeding library: a guide for genome-wide screens.</a> BMC Genomics. 12, 1471-2164 (2011).</li>
<li>Nelson, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Bow-Tie+Genetic+Architecture+for+Morphogenesis+Suggested+by+a+Genome-Wide+RNAi+Screen+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genetics%22%5BJournal%5D)">A Bow-Tie Genetic Architecture for Morphogenesis Suggested by a Genome-Wide RNAi Screen in Caenorhabditis elegans.</a> PLoS Genetics. 7, e1002010(2011).</li>
<li>Timmons, L., Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+interference+by+ingested+dsRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Specific interference by ingested dsRNA.</a> Nature. 395, 854(1998).</li>
<li>Sarin, S., Prabhu, S., O'Meara, M. M., Pe'er, I., Hobert, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caenorhabditis+elegans+mutant+allele+identification+by+whole-genome+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Caenorhabditis elegans mutant allele identification by whole-genome sequencing.</a> Nature Methods. 5, 865-867 (2008).</li>
<li>Lewis, J. A., Fleming, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basic+culture+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Basic culture methods.</a> Methods in Cell Biology. 48, 3-29 (1995).</li>
<li>Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">The genetics of Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 77, 71-94 (1974).</li>
</ol>

Nous n&#39;avons rien à communiquer.

La méthode de dépistage RNAi présentée ici permet une analyse rapide et sensible des produits des gènes nécessaires à la normale (ou transgéniques) phénotype postembryonnaire. L&#39;exemple montré est un écran de gènes impliqués dans la localisation subcellulaire d&#39;une protéine fluorescente étiqueté. Toutefois, ce protocole peut être modifié pour identifier les gènes qui affectent d&#39;autres phénotypes postembryonnaires d&#39;intérêt. Cette méthode tire parti d&#39;une approche gène ca...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Agar NGM </td><td> Milieu de croissance causée par le nématode </td><td> IPM Scientific, Inc </td><td> Peut être préparé en suivant le protocole agar NGM 25 </td></tr><tr><td> M9 moyen </td><td> 22mm KH 2 PO 4, 42mm Na 2 HPO 4, 86mm NaCl, 1 mM MgSO 4 </td><td></td><td> 26 </td></tr><tr><td> Agar-Agar </td><td> EMD Chemicals Inc </td><td> 1.01614.1000 </td><td> 2% dans de l&#39;eau pour les plaques NGM. 4% dans de l&#39;eau pour les plaquettes de lames de microscope (autoclave initialement et micro-ondes pour faire fondre par la suite). </td></tr><tr><td> Bacto Peptone </td><td> Becton Dickinson - Difco CP </td><td> 211677 </td><td> 0,25% </td&gt; </tr><tr><td> IPTG </td><td> Recherche International Products Corp </td><td> I56000-5.0 </td><td> Une concentration de 1 mM final </td></tr><tr><td> carbénicilline </td><td> Recherche International Products Corp </td><td> C46000-5.0 </td><td> 50 pg / ml de dilution de travail </td></tr><tr><td> LB Broth Lennox </td><td> Becton Dickinson - Difco CP </td><td> 240230 </td><td> 20 g / litre </td></tr><tr><td> tétracycline </td><td> Sigma </td><td> 268054 </td><td> 12,5 ug / ml de dilution de travail </td></tr><tr><td> l&#39;hypochlorite de sodium </td><td> Toute marque </td><td> Eau de javel à 5% </td><td> Utilisez l&#39;eau de Javel fraîche. </td></tr><tr><td> l&#39;hydroxyde de sodium </td><td> Toutes les marques </td><td> CAS 1310-73-2 </td><td> 5 stock N </td></tr><tr><td> Milieu M9 </td><td> Livre de recettes Wormlab </td><td> <a href="http://130.15.90.245/wormlab_recipe_book.htm#Commonlab">http://1</a>30.15.90.245/wormlab_recipe_book.htm # Commonlab </td><td> 26 </td></tr><tr><td> lévamisol </td><td> Sigma </td><td> 31742 </td><td> 100 uM - 1 mM de dilution de travail </td></tr><tr><td> azoture de sodium </td><td> Fisher Scientific </td><td> S227 </td><td> 10 mM dans M9 travail de dilution </td></tr><tr><td> 24 et la plaque </td><td> Greiner Bio-One </td><td> 662160 </td><td> Distributeur VWR </td></tr><tr><td> des lames de microscope </td><td> Toute marque </td><td> 75 x 25 x 1 mm </td><td></td></tr><tr><td> lamelles de microscope </td><td> Toute marque </td><td> 22 x 22 mm No.1.5 </td><td> Utilisez l&#39;épaisseur recommandée par le fabricant de microscope. </td></tr><tr><td> microscope composé </td><td> Carl Zeiss, Inc </td><td> A1m </td><td> Utilisez objectifs et des filtres pour répondre aux besoins de l&#39;expérience. </td></tr><tr><td> pompe médias</td><td> Manostat Varistaltic pompe </td><td> Kate modèle # 72-620-000 </td><td> Utiliser un tube et les paramètres appropriés pour la machine </td></tr></tbody></table>

dépistage arni pour identifier les phénotypes postembryonnaires dans c. elegans</em

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

C. elegans s&#39;est avéré être un système de modèle précieux pour la découverte et la caractérisation fonctionnelle des gènes de nombreuses voies et 1 gène. Des outils plus sophistiqués et les ressources pour les études dans ce système sont faciliter la découverte continue de gènes présentant des phénotypes plus subtils ou des rôles. Ici, nous présentons un protocole généralisé, nous avons adapté pour identifier C. gènes elegans avec des phénotypes postembryonnaires d&#39;intérêt en utilisant le phénomène 2. Cette procédure peut être facilement modifié pour doser le phénotype de choix, que ce soit par l&#39;optique de lumière ou de la fluorescence sur un microscope à dissection ou composé. Ce protocole de dépistage capitalise sur les actifs physiques de l&#39;organisme et des outils moléculaires de la C. elegans communauté de la recherche a produit. A titre d&#39;exemple, nous démontrons l&#39;utilisation d&#39;un transgène intégré qui exprime un produit fluorescent dans un écran ARNi pour identifier les gènes nécessaires à la localisation normale de cetteproduit chez les larves et les adultes stade tardif. Tout d&#39;abord, nous avons utilisé un génomique disponible dans le commerce bibliothèque ARNi avec pleine longueur inserts d&#39;ADNc. Cette bibliothèque facilite l&#39;identification rapide de plusieurs candidats par réduction ARNi du produit du gène candidat. Deuxièmement, nous avons généré un transgène intégré qui exprime notre protéine fluorecently marqué de l&#39;intérêt dans un contexte sensible ARNi. Troisièmement, à exposer les animaux éclos à l&#39;ARNi, cet écran permet l&#39;identification de produits géniques qui ont un rôle vital embryonnaires qui seraient autrement masquer un rôle post-embryonnaire dans la régulation de la protéine d&#39;intérêt. Enfin, cet écran utilise un microscope composé doté pour la résolution de cellule unique.

Nous décrivons une méthode pour identifier des régulateurs sensibilisés postembryonnaires de l&#39;expression des protéines et la localisation dans<em&gt; C. elegans</em&gt; L&#39;aide d&#39;un écran de génomique ARNi-sol et un transgène intégré qui exprime une fonctionnelle, la protéine fluorescente étiqueté.

Dépistage ARNi pour identifier les phénotypes postembryonnaires dans C. elegans</em

C. elegans s'est avéré être un système modèle précieux pour la découverte et la caractérisation fonctionnelle de nombreux gènes et voies génétiques1. Des systèmes plus sophistiqués...

L'objectif de cette procédure est d'identifier les régulateurs post-embryonnaires de l'expression et de la localisation des protéines chez C. elegans à l'aide d'un criblage génomique basé sur l'ARNi et de protéines marquées par fluorescence. Une fois la souche appropriée pour le criblage construite, une bibliothèque d'ARNi est choisie. La première étape de la procédure consiste à emballer les clones de la bibliothèque dans des bactéries.Les bactéries sont ensuite sélectionnées, cultivées et administrées à des nématodes C. elegans de stades déterminés. Après avoir laissé les nématodes se développer pendant 72 heures, on observe les modifications du phénotype d'intérêt. Enfin, les changements dans l'expression ou la localisation subcellulaire de la protéine ciblée sont visualisés par microscopie à fluorescence.Cette méthode peut identifier les gènes nécessaires à la bonne localisation sous-cellulaire d'une protéine marquée par un fluorophore. Toutefois, ce protocole peut être modifié pour identifier les gènes affectant d'autres phénotypes post-embryonnaires d'intérêt. Le principal avantage de cette technique par rapport aux protocoles publiés existants est que nous avons optimisé la

rnai-screening-to-identify-postembryonic-phenotypes-in-c-elegans

Research

Recherche

JoVE Journal

Biology

Biologie

Neurexines et neuroligines sont des protéines d'adhésion à la membrane des neurones, qui jouent des rôles essentiels dans la différenciation synaptique et la transmission. Mutants déficients neuroligines...

Évitement osmotique Caenorhabditis elegans: La fonction synaptique de deux gènes, orthologues de l&#39;homme NRXN1 Et NLGN1, Comme candidats pour l&#39;autisme

Imagerie C. elegans Les embryons en utilisant un microscope à épifluorescence et de logiciels Open Source

Quantitatifs et automatisé à haut débit du génome à l&#39;échelle écrans ARNi dans C. elegans</em

Nous montrons comment utiliser la technique d'alimentation ARNi pour abattre gènes cibles et le phénotype taille score de...

En utilisant l&#39;ARN médiée par la stratégie d&#39;alimentation interférences à l&#39;écran pour des gènes impliqués dans le règlement de la taille du corps du nématode<em&gt; C. elegans</em

Bien que l'ARN double brin d'alimentation en C. elegans est un outil puissant pour évaluer la fonction des gènes, les protocoles actuels pour les écrans d'alimentation à grande échelle entraînent des économies de knockdown variables. Nous décrivons un protocole amélioré pour réaliser des écrans d'alimentation d'ARNi à grande échelle qui se traduit par effet de choc très efficace et reproductible de l'expression génique.

À grande échelle Gene Knockdown dans<em&gt; C. elegans</em&gt; Utilisation ARNdb alimentation bibliothèques pour générer des phénotypes robustes perte de fonction

Ce protocole décrit comment l'image des cellules en division dans un tissu en Caenorhabditis elegans embryons. Bien que de nombreux protocoles décrivent comment la division cellulaire de l'image dans l'embryon précoce, ce protocole décrit comment l'image de la division cellulaire dans un tissu en développement au cours de l'embryogenèse tardive milieu.

Visualisation neuroblaste Cytocinèse cours<em&gt; C. elegans</em&gt; Embryogenèse

Ce travail décrit un protocole semi-haut débit qui permet l'imagerie simultanée en time-lapse 3D de l'embryogenèse dans 80-100 embryons d'élegans de C. dans une seule course de nuit. En outre, des outils de traitement d'image et de visualisation sont inclus pour rationaliser l'analyse des données. La combinaison de ces méthodes avec des souches de reporter personnalisées permet une surveillance détaillée de l'embryogenèse.

Une méthode d'imagerie semi-haut débit et une boîte à outils de visualisation de données pour analyser C. elegans Embryonic Development

Pour étudier les interactions chaperon-chaperon et chaperone-substrat, nous effectuons des écrans d’interaction synthétique chez Caenorhabditis elegans en utilisant l’interférence ARN en combinaison avec des mutations légères ou une sur-expression des chaperons et surveillons le dysfonctionnement protéique spécifique des tissus au niveau de l’organisme.

Utilisation de Caenorhabditis elegans pour dépister les interactions tissulaires spécifiques des chaperons

Le nématode génétiquement traitable Caenorhabditis elegans peut être utilisé comme modèle simple et peu coûteux pour la découverte de médicaments. Décrit ici est un protocole pour identifier les thérapies anticancéreux qui inhibent la signalisation en aval des protéines RAS et EGFR.

Identification des inhibiteurs de l’EGFR et du SRA à l’aide de Caenorhabditis elegans

Ce protocole propose une procédure simple et peu coûteuse pour quantifier le taux de létalité embryonnaire chez Caenorhabditis elegans. Il permet une détection simple des anomalies embryonnaires à travers les populations sans équipement spécialisé ni expertise en cueillement de vers. Le protocole peut être utilisé pour quantifier les effets des mutations génétiques, des dégradations génétiques médiées par l’interférence ARN et de l’alimentation.

Quantification du taux de létalité embryonnaire chez Caenorhabditis elegans

Découvrez le criblage ARNi pour identifier les régulateurs postembryonnaires de l'expression protéique chez C. elegans. Cette méthode utilise des protéines marquées par fluorescence et la microscopie pour visualiser les changements de localisation cellulaire.

Dépistage ARNi pour identifier les phénotypes postembryonnaires dans C. elegans

Explorer plus de vidéos