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DOI: 10.3791/50786-v
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Biomarqueurs de mesure dans des échantillons biologiques complexes est de plus en plus guident prise de décision clinique. Nous décrivons une méthode très sensible pour mesurer simultanément la myosine cardiaque protéine de liaison-C, la créatine kinase MB et la troponine I cardiaque dans le sérum de sujets atteints d'infarctus du myocarde et de sujets témoins en bonne santé.
L’objectif global de cette procédure est de quantifier simultanément la protéine C de liaison à la myosine cardiaque et la troponine I cardiaque dans des échantillons de sérum. Pour ce faire, il suffit d’abord d’enduire une plaque à 96 puits d’un anticorps de la protéine C de liaison à la myosine cardiaque pour un test plex, ou d’utiliser un test triplex précodé. Dans un deuxième temps, les plaques revêtues sont incubées à l’aide d’étalonneurs et d’échantillons de sérum.
Ensuite, des anticorps de détection marqués sont ajoutés à l’étape finale, un signal de chimiluminescence est produit qui est détecté par le lecteur de plaques. En fin de compte, les niveaux des protéines cardiaques d’intérêt présentes dans les échantillons de sérum peuvent être déterminés par des immunoessais simples ou multiplexes. La veille de l’expérience, pipette 30 microlitres d’anticorps monoclonal anti myosine binding protein C de souris sans gélatine dans le coin inférieur de chaque puits d’une plaque standard nue de découverte à l’échelle miso de 96 puits.
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