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Isolation des corticale microglie avec immunophénotype préservée et fonctionnalité De murins nouv...
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JoVE Journal Immunology and Infection
Isolation of Cortical Microglia with Preserved Immunophenotype and Functionality From Murine Neonates

Isolation des corticale microglie avec immunophénotype préservée et fonctionnalité De murins nouveau-nés

Full Text
16,807 Views
09:12 min
January 30, 2014

DOI: 10.3791/51005-v

Stefano G. Daniele1, Amanda A. Edwards1, Kathleen A. Maguire-Zeiss1

1Department of Neuroscience,Georgetown University Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Une des clés de réussite de l'enquête de la biologie de la microglie est la préservation de la microglie immunofunction ex vivo lors de l'isolement de tissu du SNC. Isoler la microglie par les résultats serrant rotatifs dans des cultures de cellules de grande pureté et immunofonctionnel évaluée par imagerie de fluorescence, immunocytochimie, et ELISA activation de la microglie suivante avec le lipopolysaccharide stimuli pro-inflammatoires (LPS) et Pam 3 CSK 4 (Pam).

L’objectif global de cette procédure est d’isoler la microglie corticale des nouveau-nés murins. Ceci est accompli en disséquant d’abord le tissu cérébral cortical des nouveau-nés de Muren. La deuxième étape consiste à cultiver des cultures mixtes de cellules gliales pendant 17 à 21 jours in vitro.

Ensuite, les microglies sont isolées de ces cultures gliales mixtes. La dernière étape consiste à placer des cellules microgliales dans des plaques de culture cellulaire pour des expériences ultérieures. En fin de compte, la microscopie d’immunofluorescence et Eliza sont utilisées pour montrer que ce protocole d’isolement préserve l’immunophénotype et la fonctionnalité de l’immunofluorescence microgliale.

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