Name: Suivi de la contamination microbienne dans les environnements de vente au détail à laide de poudre fluorescente - Un détail Charcuterie Environnement Exemple (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-05T17:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: Découvrez comment suivre la contamination croisée par Listeria monocytogenes dans les charcuteries de détail à l'aide de poudre fluorescente. Cette méthode permet d'améliorer les pratiques de sécurité alimentaire.

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Les auteurs tiennent à remercier tous les étudiants du laboratoire de sécurité alimentaire et les bénévoles qui ont participé à cette étude. Cette recherche a été financée par une subvention de l&#39;Initiative de sécurité nationale de l&#39;USDA intégrée des aliments (NIFSI) (Prix de # 10507316).

Une. Courbe standard <ol><li> Peser 37,5 mg poudre fluorescente et dissoudre dans 6 ml d&#39;éthanol 200 preuve. Faire 2 dilutions en série de cette solution dans l&#39;éthanol 200 preuve. </li><li> Vortex tous les échantillons pendant 10 secondes et mesurer l&#39;absorbance à 370 nm. </li><li> Calculer la quantité de poudre fluorescente par 1 ml d&#39;éthanol 200 preuve. </li><li> Préparer la courbe étalon (concentration en mg / ml sur l&#39;axe des y et l&#39;absorbance à 370 nm sur l&#39;axe des x) pour démontrer l&#39;absorbance en fonction de la concentration de poudre fluorescente. </li></ol> 2. Inoculer de charcuterie (Bologne) avec la poudre fluorescente <ol><li> Couper la viande de charcuterie dans environ 100 mm des échantillons d&#39;épaisseur à l&#39;aide d&#39;un couteau propre et planche à découper. Préparer trois échantillons étiquetés A, B, et C. </li><li> Manteau de l&#39;échantillon A uniformément avec la poudre fluorescente utilisant un peu humide, une éponge propre. Etaler la poudre sur l&#39;échantillon de viande uniformément. Ne pas inoculer des échantillons B et C avec la poudre fluorescente. </li&gt; <li> Envelopper les échantillons d&#39;une pellicule de plastique et étiqueter l&#39;échantillon revêtu de poudre fluorescente «A» et les deux autres échantillons que B et C avec du ruban adhésif. </li><li> Placer les échantillons dans le cas de la charcuterie ou un réfrigérateur qui s&#39;est tenue à 4 ° C dans la cuisine maquette où l&#39;expérience sera réalisée. </li></ol> 3. Mock Deli Préparation Cuisine <ol><li> Fournir des gants propres et 70% d&#39;éthanol par pulvérisation dans la cuisine. </li><li> Montez noir ampoules fluorescentes compactes de 13 W ampoules autour de la zone de trancheuse. </li><li> Préparer une découpe cm de feuille d&#39;aluminium de 5 cm x 5 à servir de matrice pour pistonnage. </li><li> Préparer tubes de 15 ml contenant 6 ml d&#39;éthanol à 95%. </li></ol> 4. Configuration vidéo Mont trois caméras vidéo dans des endroits stratégiques pour observer tous les domaines de la charcuterie maquette en même temps. Allumez les caméras avant de simuler la procédure de trancheuse (comme expliqué dans le protocole 5) et d&#39;analyser les résultats en même temps (commeexpliqué au protocole no 7). 5. Simulation procédures Deli trancher pour le suivi de la contamination croisée Afin d&#39;améliorer la taille de l&#39;échantillon et intégrer variation, effectuer cette étude en recrutant des participants après l&#39;approbation du protocole par le Conseil de l&#39;institution respective Institutional Review. Le participant peut être un étudiant d&#39;université qui peuvent ou peuvent ne pas avoir une expérience de travail dans des environnements de charcuterie au détail. Assurez-vous que chaque participant porte des gants une fois qu&#39;ils entrent dans les épicerie. Prenez un «avant» l&#39;image sous une lumière fluorescente noir suivi d&#39;un &quot;après&quot; image à la fin de l&#39;étude. Fournir des instructions écrites et verbales claires à chaque participant comme suit: <ol><li> Aller au réfrigérateur. </li><li> Retirer la viande étiquetée «A». </li><li> Déroulez la viande et enregistrer une pellicule de plastique. </li><li> Placez la viande sur le plateau de transport de trancheuse. </li><li> Fixer la viande avec la poignée de la viande. </li><li> Mettre l&#39;interrupteur sur ON. </li><li> Réglez slibouton d&#39;index cer à &quot;2&quot;. </li><li> Trancher et distribuer 5 morceaux de viande sur du papier épicerie. </li><li> Mettre l&#39;interrupteur sur OFF et relâchez poignée de viande. </li><li> Placer les tranches de viande dans un sac plastique étiqueté «A». </li><li> Envelopper la viande &quot;A&quot; et retourner dans le réfrigérateur. </li><li> Répétez les étapes 2-11 de viandes étiquetées «B» et «C». </li></ol> 6. Quantifier poudre fluorescente Quantifier la poudre fluorescente après l&#39;achèvement du tranchage maquette (section 5.4) dans la cuisine de la charcuterie. Pour ce faire, le texte suivant: <ol><li> Utilisez les 5 cm x 5 cm modèle de feuille d&#39;aluminium stérile et placez-le sur les zones marquées sur la figure 1. </li><li> Utiliser un tampon d&#39;alginate de calcium de coton stérile imbibé d&#39;éthanol à 95%, nettoyer la zone, et les placer dans 6 ml d&#39;éthanol à 95% dans un tube en polypropylene stérile. </li><li> Vortex le tube à fond et le transfert dans une cuvette en verre pour lire l&#39;absorbance à 370 nm. </li><li> Reportez-vous à la standard courbe pour déterminer la quantité de poudre fluorescente (y) en utilisant l&#39;équation suivante: y = mx + b où x est l&#39;absorbance, m est la pente de la courbe d&#39;étalonnage, et b est l&#39;ordonnée à l&#39;origine. </li><li> Pour la normalisation des données, le calcul de la poudre fluorescente pour cent de l&#39;air échantillonné à l&#39;aide de la formule suivante: </li></ol><img src="/files/ftp_upload/51402/51402eq1.jpg" alt="Formule 1" /> 7. Analyse de la vidéo Filmer les participants comme ils accomplir des tâches 5.1 à 5.12. Synchroniser et sauvegarder les enregistrements vidéo sur DVD de sorte que tous les angles peuvent être affichés en même temps. Regardez les vidéos pour enregistrer le nombre de touches à la main (le nombre de fois volontaires touchent les domaines de la charcuterie maquette) sur différentes surfaces dans l&#39;environnement charcuterie (4 différents chercheurs analyseront les énoncés indépendamment des données complètes).

<ol><li>Sheen, S., Hwang, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mathematical+modeling+the+cross-contamination+of+Escherichia+coli+O157%3A+H7+on+the+surface+of+ready-to-eat+meat+product+while+slicing%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing.</a> Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).</li>
<li>Crandall, P., Neal, J. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimizing+the+risk+of+Listeria+monocytogenes+in+retail+delis+by+developing+employee+focused%2C+cost+effective+training%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Minimizing the risk of Listeria monocytogenes in retail delis by developing employee focused, cost effective training.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 1, 159-174 (2011).</li>
<li>Koo, O. K., Sirsat, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+and+chemical+control+of+Salmonella+in+ready-to-eat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Physical and chemical control of Salmonella in ready-to-eat products.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 2, 56-68 (2012).</li>
<li>Hanning, I. B., Johnson, M. G., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precut+prepackaged+lettuce%3A+a+risk+for+listeriosis%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Precut prepackaged lettuce: a risk for listeriosis?</a> Foodborne Pathog. Dis. 5, 731-746 (2008).</li>
<li>Hanning, I. B., Nutt, J. D., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salmonellosis+outbreaks+in+the+United+States+due+to+fresh+produce%3A+sources+and+potential+intervention+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Salmonellosis outbreaks in the United States due to fresh produce: sources and potential intervention measures.</a> Foodborne Pathog. Dis. 6, 635-648 (2008).</li>
<li>Zhu, M., Du, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Listeria+monocytogenes+contamination+in+ready%E2%80%90to%E2%80%90eat+meat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Compr.+Rev.+Food+Sci.+Food+Safety%22%5BJournal%5D)">Control of Listeria monocytogenes contamination in ready‐to‐eat meat products.</a> Compr. Rev. Food Sci. Food Safety. 4, 34-42 (2005).</li>
<li>Lianou, A., Sofos, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+incidence+and+transmission+of+Listeria+monocytogenes+in+ready-to-eat+products+in+retail+and+food+service+environments%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A review of the incidence and transmission of Listeria monocytogenes in ready-to-eat products in retail and food service environments.</a> J. Food Protect. 70, 2172-2198 (2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+risk+assessment+of+relative+risk+to+public+health+from+foodborne+Listeria+monocytogenes+among+selected+categories+of+ready-to-eat+foods%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Quantitative risk assessment of relative risk to public health from foodborne Listeria monocytogenes among selected categories of ready-to-eat foods.</a> , http://www.fda.gov/downloads(2003 Forthcoming.</li>
<li>Endrikat, S., Gallagher, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+risk+assessment+for+Listeria+monocytogenes+in+prepackaged+versus+retail-sliced+deli+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A comparative risk assessment for Listeria monocytogenes in prepackaged versus retail-sliced deli meat.</a> J. Food Protect. 73, 612-619 (2010).</li>
<li>Pradhan, A. K., Ivanek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+public+health+impact+of+Listeria+monocytogenes+product-to-product+and+environment-to-product+contamination+of+deli+meats+at+retail%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Comparison of public health impact of Listeria monocytogenes product-to-product and environment-to-product contamination of deli meats at retail.</a> J. Food Protect. 74, 1860-1868 (2011).</li>
<li>Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Handwashing+Technique+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5900067%22%5BJournal%5D)">Handwashing Technique Analysis.</a> Patent number 5900067. , (1999).</li>
<li>Gibson, K. E., Koo, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observation+and+relative+quantification+of+cross-contamination+within+a+mock+retail+delicatessen+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Control%22%5BJournal%5D)">Observation and relative quantification of cross-contamination within a mock retail delicatessen environment.</a> Food Control. 31, 116-124 (2013).</li>
<li>Xiao, M., Zheng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5821546%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5821546. , (1998).</li>
<li>Waldroup, A., Kirby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5621215%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5621215. , (1997).</li>
<li>Ashby, K. D., Wen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+of+dietary+porphyrins+as+a+basis+for+real-time+detection+of+fecal+contamination+on+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Agric.+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorescence of dietary porphyrins as a basis for real-time detection of fecal contamination on meat.</a> J. Agric. Food Chem. 51, 3502-3507 (2003).</li>
<li>Cabrera-Diaz, E., Moseley, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+protein+marked+Escherichia+coli+biotype+I+strains+as+surrogates+for+enteric+pathogens+in+validation+of+beef+carcass+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Fluorescent protein marked Escherichia coli biotype I strains as surrogates for enteric pathogens in validation of beef carcass interventions.</a> J. Food Protect. 72, 295-303 (2009).</li>
<li>Byrd, J., Hargis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+marker+for+the+detection+of+crop+and+upper+gastrointestinal+leakage+in+poultry+processing+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Poult.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fluorescent marker for the detection of crop and upper gastrointestinal leakage in poultry processing plants.</a> Poult. Sci. 81, 70-74 (2002).</li>
<li>Vorst, K. L., Todd, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+Listeria+monocytogenes+during+mechanical+slicing+of+turkey+breast+bologna%2C+and+salami.%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Transfer of Listeria monocytogenes during mechanical slicing of turkey breast bologna, and salami.</a> J. Food Protect. 69, 619-626 (2006).</li>
</ol>

Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

L&#39;objectif général de cette étude était de démontrer comment la contamination croisée bactérienne pourrait se produire dans un environnement de charcuterie de détail afin d&#39;élaborer des stratégies pour contrôler et réduire le risque de maladie d&#39;origine alimentaire. L&#39;environnement de la charcuterie de détail présente un risque particulièrement élevé pour L. monocytogenes contamination. L&#39;USDA-FSIS rapporté que la charcuterie en tranches au magasin de détail a un sept fois plus élevé associa...

La contamination croisée des agents pathogènes d&#39;origine alimentaire dans l&#39;environnement de préparation des aliments, en particulier dans la section de détail, est une préoccupation majeure en raison d&#39;un risque accru de maladies d&#39;origine alimentaire à partir d&#39;une variété de sources, y compris les viandes ainsi que les légumes 1-5. Le plus souvent, les bactéries pathogènes pénètrent dans l&#39;environnement de vente au détail grâce à des produits alimentaires contaminés 6. Les aliments prêts-à-manger préparés au niveau du détail sont particulièrement préoccupantes, car il est généralement aucune intervention ou de traitement (c.-à-cuisson ou de chauffage) avant la consommation 7. En outre, les agents pathogènes présents sur les aliments contaminés RTE peuvent ensuite être transférées à d&#39;autres produits alimentaires ou les surfaces de contact avec les aliments dans l&#39;environnement de vente au détail. Bien que la contamination croisée peut se produire dans n&#39;importe quel type d&#39;environnement de l&#39;alimentation au détail, épiceries fines sont d&#39;un intérêt particulier en raison précisément de l&#39;association de RTE charcuterie avec l&#39;agent pathogène Listeria monocytogènes 2. Basé sur une évaluation des risques analyse menée par la US Food and Drug Administration (FDA) et le ministère de la fonction d&#39;inspection (USDA-FSIS) Agriculture salubrité des aliments et des États-Unis, les produits de charcuterie contaminés sont probablement responsables de 90% des cas de listériose - un rare maladie humaine encore grave causée par L. monocytogenes - aux États-Unis 8. En général, les produits de charcuterie en tranches dans des établissements de services de détail et des produits alimentaires ont été associées à un risque plus élevé de L. monocytogenes par rapport à la charcuterie prétranchées dans une usine inspectée par l&#39;USDA par le fabricant 9. Cela pourrait être en raison de la probabilité accrue d&#39;introduction d&#39;agents pathogènes par les manipulateurs d&#39;aliments, ingrédients bruts, ou les aliments transformés qui peuvent être contaminés de post-traitement 7. Dans l&#39;ensemble, la listériose représente environ 28% des décès estimés causés par la maladie d&#39;origine alimentaire chaque année aux États-Unis En raison de l&#39;enrisque accru de L. monocytogenes contamination dans les produits de charcuterie en tranches au niveau du détail, l&#39;épicerie se trancheuse a été identifié comme un facteur important pour le transfert de surface des agents pathogènes d&#39;origine alimentaire dans l&#39;environnement de vente au détail 2,10. Comme indiqué par Sheen 1, tranchage est la dernière étape de traitement préalable à la consommation et, par conséquent, la trancheuse de charcuterie doit être considéré comme un point de contrôle critique pour la compréhension et la prévention de la contamination croisée 1. L&#39;objectif général de cette étude était de développer une méthodologie pour suivre la contamination dans l&#39;environnement de la charcuterie de détail à l&#39;aide d&#39;une poudre fluorescente comme Glo Germ. Il s&#39;agit d&#39;un composé fluorescent qui a été utilisé pour simuler la contamination bactérienne de la croix et les pratiques d&#39;hygiène 11,12. Cette étude a été conçue pour suivre le transfert de pathogènes des viandes contaminées à la trancheuse, l&#39;environnement, et d&#39;autres produits de charcuterie. Il est crucial de comprendre les voies de contamination à développer à la fois des interventions efficaces et de matériel éducatif pour les employés et les gestionnaires de détail. Une approche similaire peut être utilisée pour simuler le transfert de pathogènes dans d&#39;autres environnements de traitement (par exemple, de volaille et de bœuf), les fermes et les hôpitaux.

<table><tbody><tr><td>Glo Germ Poudre</td><td>Glo Germ Co</td><td></td><td>Acheté auprès du vendeur</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Sigma</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>Marqueurs permanents</td><td>Sharpie</td><td></td><td>Acheté dans un magasin stationnaire</td></tr><tr><td></td><td>Gants VWR</td><td>82026-424</td><td></td></tr><tr><td>Charcuterie NA</td><td></td><td>NA</td><td>Bologna Chub dans un magasin d’épicerie ordinaire Planche à</td></tr><tr><td>découper</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Une planche à découper de cuisine regukar</td></tr><tr><td>Couteau</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Un couteau de cuisine ordinaire&nbsp ;</td></tr><tr><td>Gabarits stériles de 5 cm x 5 cm</td><td>NA</td><td></td><td>NA Gabarits en papier d’aluminium découpés en gabarits de 5 cm x 5 cm et stérilisés&nbsp ;</td></tr><tr><td>15 ml Tubes à centrifuger en polypropylène</td><td>VWR</td><td>89039-664</td><td></td></tr><tr><td>Cotons-tiges</td><td>Puritan</td><td>25-806</td><td></td></tr><tr><td>Cuvettes en verre</td><td>VWR</td><td>470019-186</td><td></td></tr><tr><td>Vortex</td><td>VWR</td><td>58816-121</td><td></td></tr><tr><td>Caméra à bascule</td><td>Flip Ultra HD</td><td>NA</td><td>Acheté en ligne</td></tr><tr><td>Trancheuse à charcuterie</td><td>Bizerba</td><td>SE-12</td><td></td></tr><tr><td>Réfrigérateur à charcuterie</td><td>True Company</td><td>TDBD-722</td><td></td></tr><tr><td>Échelle</td><td></td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre</td><td>Milton Roy Company</td><td>NA</td><td>Spectronic 20D</td></tr></tbody></table>

suivi de la contamination microbienne dans les environnements de vente au détail à l&#39;aide de poudre fluorescente - un détail charcuterie environnement exemple

Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

La contamination croisée des agents pathogènes d&#39;origine alimentaire dans l&#39;environnement de vente au détail est un problème de santé publique important contribuant à un risque accru de maladie d&#39;origine alimentaire. Les aliments prêts-à-manger (PAM) transformés tels que les produits de charcuterie, de fromage, et dans certains cas des produits frais, ont été impliqués dans des flambées de maladies d&#39;origine alimentaire dues à la contamination par des agents pathogènes comme Listeria monocytogenes. En ce qui concerne L. monocytogenes, trancheuses de charcuterie sont souvent la principale source de contamination croisée. L&#39;objectif de cette étude était d&#39;utiliser un composé fluorescent pour simuler la contamination bactérienne et le suivi de cette contamination dans un environnement de détail. Une cuisine d&#39;épicerie maquette a été conçu pour simuler l&#39;environnement de vente au détail. Charcuterie a été inoculé avec le composé fluorescent et les bénévoles ont été recrutés pour compléter un ensemble de tâches similaires à ceux attendus d&#39;un employé de la distribution alimentaire. Les volontaires ont été invités à trancher, ensemble, et de stocker la viande dans un réfrigérateur épicerie. Le potentielcontamination croisée a été suivi dans l&#39;environnement simulé détail par écouvillonnage des zones spécifiques et en mesurant la densité optique de la zone frottée avec un spectrophotomètre. Les résultats ont indiqué que le réfrigérateur (c.-à-épicerie cas) adhérence et les différents domaines de la trancheuse avaient le risque le plus élevé de contamination croisée. Les résultats de cette étude peuvent être utilisés pour développer du matériel de formation plus ciblée pour les employés au détail. En outre, des méthodes similaires pourraient également être utilisés pour suivre la contamination microbienne dans les environnements de production alimentaire (par exemple de petites fermes), les hôpitaux, maisons de soins infirmiers, les navires de croisière et les hôtels.

Figure 1 représente les domaines de la trancheuse qui ont été frottée après les bénévoles ont complété les tâches assignées. Les bénévoles ont été filmés pour analyser la fréquence moyenne des contacts de la main sur ces différentes surfaces. La fréquence des contacts de la main a été analysée par quatre observateurs différents et moyenne. Ces résultats sont illustrés sur la figure 2. Les données montrent que la poignée de la viande, emballage de charcuterie, de la viande de charcuterie...

L&#39;objectif général de cette étude était de démontrer le mécanisme de contamination croisée potentielle de pathogènes d&#39;origine alimentaire Listeria monocytogenes dans un cadre de charcuterie au détail. Cette méthodologie peut être appliquée à une variété d&#39;environnements différents pour suivre la contamination de l&#39;agent pathogène.

Suivi de la contamination microbienne dans les environnements de vente au détail à l&#39;aide de poudre fluorescente - Un détail Charcuterie Environnement Exemple

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne ...

L'objectif général de cette procédure est de démontrer le mécanisme potentiel de contamination croisée du pathogène alimentaire *Listeria monocytogenes* dans un environnement de charcuterie de détail. Cette démonstration est réalisée en concevant d'abord une cuisine de charcuterie factice afin de simuler l'environnement de vente au détail.Dans la deuxième étape, une charcuterie est inoculée avec un composé fluorescent, puis des volontaires sont invités à trancher, emballer et entreposer la charcuterie recouverte au réfrigérateur. Dans la dernière étape, la contamination croisée potentielle est suivie en observant le composé fluorescent sous lumière noire. En fin de compte, la spectrométrie peut être utilisée pour quantifier le composé fluorescent, illustrant ainsi la manière dont la contamination croisée se produit dans l’environnement des charcuteries de détail.Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes utilisant des micro-organismes réside dans la possibilité de quantifier rapidement le composé fluorescent par photométrie spectrale. Bien que cette méthode puisse fournir des informations utiles dans le secteur de la vente au détail, elle peut également être appliquée à d'autres systèmes tels que les petites exploitations agricoles, les usines de transformation alimentaire et d'autres opérations de restauration. Commencez par placer des gants propres et de l'éthanol à 70 % sur le comptoir pour les utiliser pendant la procédure.Ensuite, utilisez un couteau propre et une planche à découper pour couper la viande froide en trois échantillons d'environ 100 millimètres d'épaisseur. Utilisez ensuite une éponge propre légèrement humide pour recouvrir uniformément un échantillon de poudre fluorescente fraîchement préparée. Ensuite, enveloppez tous les échantillons dans un film plastique et utilisez du ruban adhésif pour étiqueter l'échantillon recouvert de poudre fluorescente comme a, et les deux échantillons restants comme b et c.Ensuite, placez les échantillons à quatre degrés Celsius et installez des lampes fluorescentes compactes noires équipées d'ampoules de 13 watts autour de la zone du trancheur. Découpez un morceau de papier d’aluminium de cinq centimètres sur cinq pour servir de gabarit lors du prélèvement par écouvillonnage, et remplissez des tubes de 1315 millilitres avec six millilitres d’éthanol à 95 % à ce moment-là également. Puis installez trois caméras vidéo à des emplacements stratégiques afin d’observer simultanément toutes les zones du comptoir de charcuterie simulé.Pour suivre la contamination de la charcuterie par la poudre fluorescente, allumez les caméras afin d'enregistrer les participants pendant la procédure et prenez une photo de la charcuterie factice sous lumière noire avant le début. Ensuite, demandez à chaque participant d'effectuer les étapes suivantes. Premièrement, retirer l'échantillon de viande étiqueté A du réfrigérateur.Ensuite, déballez la viande en conservant l'emballage plastique, puis placez l'échantillon sur le plateau du chariot de la trancheuse. Fixez l'échantillon à l'aide de la pince à viande, puis allumez la trancheuse et réglez le bouton d'index de la trancheuse sur deux. Ensuite, tranchez et déposez cinq morceaux de viande sur le papier d'épicerie, puis éteignez l'appareil et relâchez la pince à viande.Placer les tranches de viande dans un sac en plastique étiqueté A, puis réemballer l'échantillon de viande et le remettre au réfrigérateur après avoir prélevé les échantillons B et C comme vient d'être démontré, après la prise de vue de la cuisine factice. Pour quantifier la contamination par la poudre fluorescente, poser le gabarit stérile en feuille d'aluminium sur chacune des zones indiquées sur l'image. Ensuite, frotter chaque zone avec un écouvillon stérile en ouate d'alginate de calcium, imprégné d'Éthanol à 95 %, et placer un écouvillon dans chacun des tubes contenant de l'Éthanol à 95 %.Vortexez soigneusement chaque tube, puis transférez le contenu dans des cuvettes en verre individuelles. Lisez l'absorbance de chaque échantillon de prélèvement à 370 nanomètres, puis utilisez la formule pour calculer la quantité de poudre fluorescente prélevée sur chaque zone. Enfin, visionnez la vidéo pour quantifier le nombre de fois que les différentes surfaces du mannequin ont été touchées.Dans cette expérience représentative, des volontaires ont été filmés afin d'analyser la fréquence moyenne de contact manuel avec différentes surfaces de la trancheuse à viande lors de la préparation des tranches de charcuterie. Ensuite, différents observateurs ont analysé la vidéo et la fréquence des contacts manuels a été moyennée. Les données indiquent que, comme prévu, la poignée de la trancheuse, l'emballage de la viande, la charcuterie et le papier d'emballage ont enregistré les taux les plus élevés de contacts manuels, avec une moyenne de huit à quatorze contacts par participant.Des surfaces telles que le réfrigérateur, la table de préhension, la poignée à viande, la lame de trancheuse et divers composants du plateau de chariot ont ensuite été prélevées par écouvillonnage, et la quantité de poudre fluorescente sur les différents composants de la trancheuse et de la cuisine factice a été quantifiée. Comme vient de l'être démontré, comme prévu. Les résultats ont indiqué que les niveaux les plus élevés de contamination se trouvaient sur le réfrigérateur, la poignée, la poignée à viande et les plaques arrière.Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de penser à activer simultanément les caméras vidéo afin de garantir la synchronisation des images. Cette méthode peut aider à répondre à des questions essentielles dans le domaine de la sécurité alimentaire, comme la manière dont se produit la contamination croisée, et permettre de développer des pratiques de formation efficaces fondées sur nos résultats.

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Ce protocole décrit un simple adhésif à base de bandes approche pour l'échantillonnage de tomate et d'autres surfaces de produits frais, suivie d'une détection rapide des cellules de l'ensemble...

Combinaison de adhésif à base de bandes d&#39;échantillonnage et de fluorescence In situ</emHybridation> pour la détection rapide des Salmonella Sur les produits frais

Nous avons récemment rapporté une nouvelle approche pour générer des sondes DNAzyme fluorogènes qui peuvent être appliqués à mettre en place un simple, «mix-and-lire" immunofluorescence pour la détection bactérienne. Ces sondes d'ADN spécifiques catalyser le clivage d'un chromophore de modification d'ADN-ARN substrat chimérique en présence d'un mélange brut extracellulaire (LEC) produite par une bactérie spécifique, traduisant ainsi la détection de bactéries dans la génération du signal de...

Détection des bactéries à l&#39;aide ADNzymes fluorogènes

Cette vidéo présente un test permettant de mesurer l’accumulation d’une sonde antibiotique fluorescente dans des cellules bactériennes. L’exposition à un inhibiteur de la pompe à efflux perturbe le gradient transmembranaire de protons dans les cellules bactériennes, auquel un antibiotique conjugué à un fluorophore est ajouté. L’inhibition des pompes d’efflux due à la perturbation du gradient de protons provoque l’accumulation de l’antibiotique à l’intérieur de la bactérie. Les cellules...

Un test pour mesurer l’accumulation d’une sonde antibiotique fluorescente dans des cellules bactériennes

Un protocole impliquant la concentration, l’enrichissement et la détection colorimétrique intégrée des agents pathogènes d’origine alimentaire dans de grands volumes d’eau agricole est présenté ici.  L’eau est filtrée à l’aide d’écouvillons Moore modifiés (MMS), enrichis de milieux sélectifs ou non sélectifs, et la détection est effectuée à l’aide de dispositifs analytiques à base de papier (μPAD) intégrés dans des substrats colorimétriques bactériens-indicatifs.

Détection colorimétrique sur papier d’Escherichia coli, de Salmonella spp. et de Listeria monocytogenes dans de grands volumes d’eau agricole

Un protocole basé sur la PCR a été adapté pour détecter Cronobacter spp., Salmonella enterica et Listeria monocytogenes à partir des surfaces corporelles et des canaux digestifs de mouches sauvages individuelles. L’objectif de ce protocole est de détecter et d’isoler les bactéries pathogènes à partir d’insectes individuels prélevés dans le cadre d’un programme d’échantillonnage environnemental au cours d’enquêtes sur des éclosions d’origine alimentaire.

Détection de bactéries pathogènes d&#39;origine alimentaire de mouches individuelle Filth

Le rôle de l'assortiment (ségrégation spatiale) dans les scénarios d'évolution peut être examinée à l'aide des systèmes microbiens simples en laboratoire qui permettent le réglage de la distribution spatiale contrôlée. En modifiant la densité cellulaire fondateur, différents niveaux d' assortiment peuvent être visualisées en utilisant des souches bactériennes marquées par fluorescence dans les biofilms de colonies de Bacillus subtilis.

Surveillance spatiale Ségrégation en surface Colonizing populations microbiennes

L’objectif général du présent protocole est de synthétiser des nano-capteurs fonctionnels pour la portable, rentable, et une détection rapide des spécifiquement les bactéries pathogènes grâce à une combinaison de relaxation magnétique et modalités d’émission de fluorescence.

Pathogènes d’origine alimentaire préalable à l’aide de magnéto-fluorescent NANOCAPTEUR : Détection rapide d’e. Coli O157 : H7

Présenté ici est un protocole pour une seule cellule, l'épifluorescence technique basée sur la microscopie pour quantifier les taux de pâturage chez les eucaryotes prédateurs aquatiques avec une haute précision et une résolution taxonomique.

Bactéries étiquetées fluorescentes comme traceur pour révéler de nouvelles voies de flux de carbone organique dans les écosystèmes aquatiques

L'objectif de ce protocole est de détecter différents toxinotypes de Clostridium perfringens dans les aliments achetés localement, en particulier la toxine d'epsilon produisant des types de souche B et D, sans l'utilisation des chambres anaérobies.

L'enrichissement et la détection des toxines de Clostridium perfringens dans les échantillons d'aliments au détail

Les antibiotiques étiquetés fluorescents sont des outils puissants qui peuvent être utilisés pour étudier de multiples aspects de la résistance aux antimicrobiens. Cet article décrit la préparation des antibiotiques fluorescents marqués et leur application à l’étude de la résistance aux antibiotiques chez les bactéries. Les sondes peuvent être utilisées pour étudier les mécanismes de résistance bactérienne (p. ex., efflux) par spectrophotométrie, cytométrie du débit et microscopie.

Visualisation de la résistance bactérienne à l’aide de sondes antibiotiques fluorescentes

Le protocole résume les pratiques exemplaires pour minimiser la charge microbienne dans un environnement de salle blanche et comprend des stratégies telles que la surveillance environnementale, la surveillance des procédés et les tests de stérilité des produits. Elle est pertinente pour les installations de fabrication et d’essai qui sont tenues de respecter les normes actuelles de bonnes pratiques tissulaires et les normes actuelles de bonnes pratiques de fabrication.

Stratégies de contrôle et de surveillance microbiens pour les environnements de salle blanche et les thérapies cellulaires

Découvrez comment suivre la contamination croisée par Listeria monocytogenes dans les charcuteries de détail à l'aide de poudre fluorescente. Cette méthode permet d'améliorer les pratiques de sécurité alimentaire.

Suivi de la contamination microbienne dans les environnements de vente au détail à laide de poudre fluorescente - Un détail Charcuterie Environnement Exemple (Vidéo) | JoVE Journal

Suivi de la contamination microbienne dans les environnements de vente au détail à l'aide de poudre fluorescente - Un détail Charcuterie Environnement Exemple

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