Isolement et caractérisation de souris Antral ovocytes Basé sur Nucleolar Organisation chromatine

L’objectif global de cette procédure est de détailler toutes les étapes nécessaires à la caractérisation des ovocytes antraux de souris en fonction de leur organisation chromainienne, en fonction de leur capacité à soutenir pleinement un développement embryonnaire prospectif. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie du développement, telles que la distinction et l’isolement de deux types différents d’ooyctes antraux, SN, nucléole entouré, et NSN, nucléole non entouré, résidant dans le compartiment antral de l’ovaire de mammifère. Pour récolter les ovaires, commencez par injecter chez des souris femelles de trois à six semaines IP 2,5 unités internationales de gonadotrophine sérique de jument gravide.

Deux jours plus tard, environ une heure avant la récolte, remplissez une boîte de Pétri stérile avec du milieu M2 et ajoutez plusieurs gouttes de 20 litres de milieu M2 à une deuxième boîte de Pétri, en recouvrant chaque goutte de 1,5 millilitre d’huile minérale. Transférez ensuite toutes les boîtes de Pétri dans un incubateur à 37 degrés Celsius, 5 % de dioxyde de carbone pour permettre au milieu de s’équilibrer. Ensuite, utilisez des ciseaux de dissection stériles pour faire une incision dans la peau recouvrant la paroi abdominale, suivie d’une incision dans le péritoine de la première souris injectée d’hormone.