Test de compétition Oligopeptide pour la détermination du site de phosphorylation

L’objectif global de cette procédure est d’évaluer simultanément plusieurs sites de phosphorylation potentiels et d’identifier des sites pour une validation ultérieure par des mutants de sites de phosphorylation. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans les domaines de la biochimie et de la biologie cellulaire sur le rôle des modifications post-traductionnelles dans la signalisation cellulaire. Cette technique permet un criblage préliminaire facile et économique des sites de phosphorylation et de la protéine d’intérêt.

L’implication de cette technique s’est étendue au diagnostic et au traitement de maladies, y compris l’inflammation et le cancer, car la phosphorylation est un événement biochimique important dans les voies de signalisation des maladies humaines. L’aide à la démonstration serait assurée par Sol-Bi Shin, un étudiant diplômé de mon laboratoire, qui, tout en effectuant une mutagénèse dirigée. Combinez d’abord 50 nanogrammes de plasma pGEX JST NRF2, 125 nanogrammes d’amorce directe, 125 nanogrammes d’amorce inverse, un microlitre de DNTP mélangez 2,5 unités d’ADN polymérase PFU et 10x tampon de réaction sur glace.