Détection de hétérodimérisation des isoformes de protéines à l’aide d’un test in Situ proximité ligature

L’analyse de ligature de proximité in situ ou PLA, est une technologie capable de détecter les interactions entre les protéines, les tissus apposés et les cellules. Les associations entre les protéines peuvent être identifiées et quantifiées sans avoir besoin d’expression transgénique ou de techniciens supplémentaires. La seule exigence est la disponibilité d’anticorps spécifiques à haut rendement qui peuvent être modifiés avec des oligonucléotides d’ADN.

Dans les tissus MST1 et MST2 existent principalement en tant qu’homodimers actifs, mais les stimuli oncogènes peuvent augmenter le niveau d’heterodimers MST1 MST2 et ces heterodimers sont inactifs. Après incubation avec des anticorps d’amorce spécifiques contre les protéines d’intérêt, des anticorps secondaires spécifiques spéciaux, chacun lié à un brin d’ADN unique, court et complémentaire qui lui est attaché, sont ajoutés à la fente pour se lier aux anticorps primaires. Si les protéines en question sont heterodimérisées, les anticorps primaires et les anticorps secondaires qui y sont liés seront à proximité.