Name: ניתוח הביטוי והרכבת הקומפלקסים של חלבוני שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית בשמרי הביקוע Schizosaccharomyces pombe (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 7 s
Description: חקור את הרכבת קומפלקסי שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית בשמרי הביקוע Schizosaccharomyces pombe. הפרוטוקול כולל בידוד מיטוכונדריה, SDS-PAGE, BN-PAGE ואימונובלוטינג לניתוח חלבונים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Schatz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Getting+mitochondria+to+center+stage%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Comm%22%5BJournal%5D)">Getting mitochondria to center stage.</a> Biochem Biophys Res Comm. 434 (3), 407-410 (2013).</li>
<li>Schapira, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial disease.</a> Lancet. 368 (9529), 70-82 (2006).</li>
<li>Lin, M. T., Beal, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dysfunction+and+oxidative+stress+in+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dysfunction and oxidative stress in neurodegenerative diseases.</a> Nature. 443 (7113), 787-795 (2006).</li>
<li>Malina, C., Larsson, C., Nielsen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yeast+mitochondria%3A+an+overview+of+mitochondrial+biology+and+the+potential+of+mitochondrial+systems+biology%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Yeast+Res%22%5BJournal%5D)">Yeast mitochondria: an overview of mitochondrial biology and the potential of mitochondrial systems biology.</a> FEMS Yeast Res. 18 (5), (2018).</li>
<li>Kühl, I., Dujeancourt, L., Gaisne, M., Herbert, C. J., Bonnefoy, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genome+wide+study+in+fission+yeast+reveals+nine+PPR+proteins+that+regulate+mitochondrial+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">A genome wide study in fission yeast reveals nine PPR proteins that regulate mitochondrial gene expression.</a> Nucl Acid Res. 39 (18), 8029-8041 (2011).</li>
<li>Uehara, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+nutritional+phenotypes+of+fission+yeast+mutants+defective+in+genes+encoding+essential+mitochondrial+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biol%22%5BJournal%5D)">Multiple nutritional phenotypes of fission yeast mutants defective in genes encoding essential mitochondrial proteins.</a> Open Biol. 11 (4), 200369(2021).</li>
<li>Mori, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+fission+yeast%2C+65+non-essential+mitochondrial+proteins+related+to+respiration+and+stress+become+essential+in+low-glucose+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Rl+Soc+Open+Sci%22%5BJournal%5D)">In fission yeast, 65 non-essential mitochondrial proteins related to respiration and stress become essential in low-glucose conditions.</a> Rl Soc Open Sci. 10 (10), 230404(2023).</li>
<li>Vercellino, I., Sazanov, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+assembly%2C+regulation+and+function+of+the+mitochondrial+respiratory+chain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The assembly, regulation and function of the mitochondrial respiratory chain.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 23 (2), 141-161 (2022).</li>
<li>Rich, P. R., Maréchal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mitochondrial+respiratory+chain%5BTitle%5D)+AND+%22Essays+Biochem%22%5BJournal%5D)">The mitochondrial respiratory chain.</a> Essays Biochem. 47, 1-23 (2010).</li>
<li>Lobo-Jarne, T., Ugalde, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+chain+supercomplexes%3A+Structures%2C+function+and+biogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Respiratory chain supercomplexes: Structures, function and biogenesis.</a> Semin Cell Dev Biol. 76, 179-190 (2018).</li>
<li>Guan, S., Zhao, L., Peng, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+Respiratory+Chain+Supercomplexes%3A+From+Structure+to+Function%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial Respiratory Chain Supercomplexes: From Structure to Function.</a> Int J Mol Sci. 23 (22), 13880(2022).</li>
<li>Luttik, M. A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Saccharomyces+cerevisiae+NDE1+and+NDE2+Genes+Encode+Separate+Mitochondrial+NADH+Dehydrogenases+Catalyzing+the+Oxidation+of+Cytosolic+NADH%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The Saccharomyces cerevisiae NDE1 and NDE2 Genes Encode Separate Mitochondrial NADH Dehydrogenases Catalyzing the Oxidation of Cytosolic NADH.</a> J Biol Chem. 273 (38), 24529-24534 (1998).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yeast+AMID+Homologue+Ndi1p+Displays+Respiration-restricted+Apoptotic+Activity+and+Is+Involved+in+Chronological+Aging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Yeast AMID Homologue Ndi1p Displays Respiration-restricted Apoptotic Activity and Is Involved in Chronological Aging.</a> Mol Biol Cell. 17 (4), 1802-1811 (2006).</li>
<li>Malecki, M., Bähler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+genes+required+for+respiratory+growth+of+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Wellcome+Open+Rese%22%5BJournal%5D)">Identifying genes required for respiratory growth of fission yeast.</a> Wellcome Open Rese. 1, 12(2016).</li>
<li>Luo, Y., Xu, Y., Ahmad, F., Feng, G., Huang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Shy1%2C+the+Schizosaccharomyces+pombe+homolog+of+human+SURF1%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Characterization of Shy1, the Schizosaccharomyces pombe homolog of human SURF1.</a> Sci Rep. 14 (1), 21678(2024).</li>
<li>Wang, Y., Feng, G., Huang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Schizosaccharomyces+pombe+DEAD-box+protein+Mss116+is+required+for+mitoribosome+assembly+and+mitochondrial+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Mitochondrion%22%5BJournal%5D)">The Schizosaccharomyces pombe DEAD-box protein Mss116 is required for mitoribosome assembly and mitochondrial translation.</a> Mitochondrion. 76, 101881(2024).</li>
<li>Izawa, T., Unger, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+Mitochondria+from+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Meth+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Isolation of Mitochondria from Saccharomyces cerevisiae.</a> Meth Mol Biol. 1567, 33-42 (2017).</li>
<li>Gregg, C., Kyryakov, P., Titorenko, V. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+Mitochondria+from+Yeast+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Purification of Mitochondria from Yeast Cells.</a> J Vis Exp. (30), e1417(2009).</li>
<li>Schägger, H., von Jagow, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blue+native+electrophoresis+for+isolation+of+membrane+protein+complexes+in+enzymatically+active+form%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">Blue native electrophoresis for isolation of membrane protein complexes in enzymatically active form.</a> Anal Biochem. 199 (2), 223-231 (1991).</li>
<li>Schägger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Native+electrophoresis+for+isolation+of+mitochondrial+oxidative+phosphorylation+protein+complexes%5BTitle%5D)+AND+%22Meth+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Native electrophoresis for isolation of mitochondrial oxidative phosphorylation protein complexes.</a> Meth Enzymol. 260 (C), 190-202 (1995).</li>
<li>Schägger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blue-native+gels+to+isolate+protein+complexes+from+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Meth+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Blue-native gels to isolate protein complexes from mitochondria.</a> Meth Cell Biol. (65), 231-244 (2001).</li>
<li>Wittig, I., Braun, H. P., Schägger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blue+native+PAGE%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Blue native PAGE.</a> Nat Protoc. 1 (1), 418-428 (2006).</li>
<li>Lemaire, C., Dujardin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+respiratory+chain+complexes+from+Saccharomyces+cerevisiae+wild-type+and+mutant+mitochondria+activity+measurement+and+subunit+composition+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Meth+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Preparation of respiratory chain complexes from Saccharomyces cerevisiae wild-type and mutant mitochondria activity measurement and subunit composition analysis.</a> Meth Mol Biol. 432, 65-81 (2008).</li>
<li>Konovalova, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+Mitochondrial+Respiratory+Chain+Complexes+in+Cultured+Human+Cells+using+Blue+Native+Polyacrylamide+Gel+Electrophoresis+and+Immunoblotting%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Analysis of Mitochondrial Respiratory Chain Complexes in Cultured Human Cells using Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis and Immunoblotting.</a> J Vis Exp. (144), e59269(2019).</li>
<li>Fiala, G. J., Schamel, W. W. A., Blumenthal, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blue+Native+Polyacrylamide+Gel+Electrophoresis+%28BN-PAGE%29+for+Analysis+of+Multiprotein+Complexes+from+Cellular+Lysates%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis (BN-PAGE) for Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates.</a> J Vis Exp. (48), e2164(2011).</li>
<li>Flor-Parra, I., Zhurinsky, J., Bernal, M., Gallardo, P., Daga, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Lallzyme+MMX-based+rapid+method+for+fission+yeast+protoplast+preparation%5BTitle%5D)+AND+%22Yeast%22%5BJournal%5D)">A Lallzyme MMX-based rapid method for fission yeast protoplast preparation.</a> Yeast. 31 (2), 61-66 (2014).</li>
<li>Sellem, C. H., Lemaire, C., Lorin, S., Dujardin, G., Sainsard-Chanet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+Between+the+oxa1+and+rmp1+Genes+Modulates+Respiratory+Complex+Assembly+and+Life+Span+in+Podospora+anserina%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Interaction Between the oxa1 and rmp1 Genes Modulates Respiratory Complex Assembly and Life Span in Podospora anserina.</a> Genetics. 169 (3), 1379-1389 (2005).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>6-חומצת אמינוקפרויס</td><td>סנגון</td><td>A430196</td><td></td></tr><tr><td>אקרילאמיד/ביס (37.5: 1) 40%&nbsp;</td><td>Biolab</td><td>GS1374</td><td></td></tr><tr><td>אמוניום פרסולפט</td><td>סנגון</td><td>A100486</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן נגד Atp6</td><td>Bioworld</td><td>IB פנימי</td>: <td>1:200</td></tr><tr><td>נוגדן נגד Cob1</td><td>Bioworld</td><td>IB פנימי</td>: <td>1:1000</td></tr><tr><td>נוגדן Anti-Cox1</td><td>Bioworld</td><td>IB פנימי</td>: <td>1:2000</td></tr><tr><td>נוגדן נגד Cox2</td><td>Bioworld</td><td>IB פנימי</td><td>: 1:1000</td></tr><tr><td>נוגדן Anti-Cox3</td><td>Bioworld</td><td>Inhouse</td><td>IB: 1:200</td></tr><tr><td>נוגדן Anti-Hsp60</td><td>Bioworld</td><td>Inhouse</td><td>IB: 1:3000</td></tr><tr><td>BCA ערכת כימות חלבון</td><td>LEAGENE</td><td>PT0001</td><td></td></tr><tr><td>Bis-Tris</td><td>YEASEN</td><td>60105ES25</td><td></td></tr><tr><td>Coomassie Brilliant Blue G-250</td><td>SERVA</td><td>17524.01</td><td></td></tr><tr><td>Coomassie Brilliant Blue R-250</td><td>Sangon</td><td>A100472</td><td></td></tr><tr><td>Digitonin</td><td>Sigma</td><td>D141</td><td></td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Sangon</td><td>A100691</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Solarbio</td><td>E8030</td><td></td></tr><tr><td>Gradient mixer</td><td>דוחן מדעי</td><td>MGM-50</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Solarbio</td><td>H8090</td><td></td></tr><tr><td>סמן חלבון במשקל מולקולרי גבוה עבור מקורי PAGE</td><td>זמנים אמיתיים</td><td>RTD6142</td><td></td></tr><tr><td>IgG-Alexa Fluor Plus 800 (נוגדן משני נגד ארנב)</td> <td>Thermo Fisher</td><td>A32735</td><td>IB: 1:10000</td></tr><tr><td>Immobilon-FL 0.45 &mu; m PVDF ממברנה</td><td>Millipore</td><td>IPFL00005</td><td></td></tr><tr><td>Kimble Kontes מטחנת רקמות Dounce</td><td>Thermo Fisher</td><td>K8853000015</td><td></td></tr><tr><td>KOH</td><td>Sangon</td><td>A610441</td><td></td></tr><tr><td>Lallzyme MMX</td><td>Lallemand</td><td>N.A.</td><td></td></tr><tr><td>אנזים ליזינג</td><td>Sigma</td><td>L3768</td><td></td></tr><tr><td>Lyticase</td><td>Sigma</td><td>L4025</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2</td><td>Sangon</td><td>A601336</td><td></td></tr><tr><td>MOPS</td><td>Sangon</td><td>A421333</td><td></td></tr><tr><td>ג'ל ביס-טריס טבעי (טרומי)</td><td>Solarbio</td><td>PG41510-N</td><td></td></tr><tr><td>PMSF</td><td>Sangon</td><td>A610425</td><td></td></tr><tr><td>ג'ל טרום יצוק חוצץ ל-Native-PAGE</td><td>Solarbio</td><td>PG00020-N</td><td></td></tr><tr><td>קוקטייל מעכב פרוטאז לתמציות שמרים</td><td>Beyotime</td><td>P1020</td><td></td></tr><tr><td>סוכרוז</td><td>סנגון</td><td>A610498&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>TEMED</td><td>Sigma</td><td>T9281</td><td></td></tr><tr><td>Tricine</td><td>Sigma</td><td>T0377</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Solarbio</td><td>T8220</td><td></td></tr><tr><td>Vinotaste</td><td>Novozymes</td><td>N.A.</td><td></td></tr><tr><td>Zymolyase</td><td>MP ביומדיקל</td><td>320921</td><td></td></tr></tbody></table>

ניתוח הביטוי והרכבת הקומפלקסים של חלבוני שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית בשמרי הביקוע schizosaccharomyces pombe

Analysis of the Expression and Complexes Assembly of the Mitochondrial Respiratory Chain Proteins in the Fission Yeast Schizosaccharomyces pombe

בעבר השתמשנו בפרוטוקול זה כדי לחקור את ההשפעות של מחיקת shy1, הומולוג S. pombe של SURF1 אנושי, על ביטוי חלבוני שרשרת נשימה מקודדים mtDNA והרכבה של קומפלקסים של שרשרת נשימה מיטוכונדריאלית. מצאנו שרמות המצב היציב של Cob1, Cox1, Cox2, Cox3 ו-Atp6 הופחתו באופן משמעותי בזן Δshy1 (איור 3), מה שמצביע על כך ש-Shy1 נדרש לביטוי של חלבוני שרשרת נשימה המקודדים על ידי mtDNA. יתר על כן, ניתוח BN-PAGE הראה כי השפע של קומפלקסי שרשרת נשימה מסיסים ב-DG III2IV2 ו-III2IV הופח...

ניתוח הביטוי והרכבת הקומפלקסים של חלבוני שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית בשמרי הביקוע Schizosaccharomyces pombe

The mitochondrial respiratory chain is crucial for cellular energy metabolism, serving as the core of oxidative phosphorylation. The mitochondrial ...

analysis-expression-complexes-assembly-mitochondrial-respiratory

Research

JoVE Journal

Biochemistry

ביוכימיה

אנו מציגים פרוטוקול של איך לאסוף ואלקטרון תהליך cryo-tomograms של כל המיטוכונדריה. הטכניקה מספקת מידע מפורט לגבי המבנה, תפקוד, והארגון של קומפלקסי חלבוני קרום גדולים בקרומים ביולוגיים מקומיים.

ויזואליזציה של הדימרים synthase ATP במיטוכונדריה על ידי אלקטרונים קריו טומוגרפיה

פרוטוקול זה מתאר את ההפרדה של מיטוכונדריאלי תפקודי שרשרת התחבורה אלקטרונים מתח (Cx) IV ו supercomplexes מהם באמצעות אלקטרופורזה יליד לחשוף מידע על הרכבה שלהם המבנה. ג'ל הילידים יכול להיות נתון immunoblotting, מבחני ג'ל, וטיהור על ידי electroelution כדי לאפיין עוד קומפלקסים בודדים.

ניתוח Supercomplexes של Mitochondrial אלקטרונים שרשרת התחבורה עם אלקטרופורזה הילידים, ב-מבחני ג&#39;ל, ו Electroelution

פרוטוקול זה מדגים הניתוח קומפלקסי שרשרת הנשימה מיטוכונדריאלי מאת כחול מקורי לזיהוי בג'ל. כאן מתוארת השיטה להחיל בתרבית תאים אנושיים.

ניתוח של מתחמי שרשרת הנשימה מיטוכונדריאלי בתאים תרבותי אנושי באמצעות כחול מקורי לזיהוי בג'ל ו- Immunoblotting

כאן אנו מציגים פרוטוקול לחלץ, לפתור ולזהות supercomplexes מיטוכונדריאלי אשר ממזער את החשיפה לדטרגנטים וכחול Coomassie. פרוטוקול זה מציע איזון מיטבי בין רזולוציה, ושימור פעילויות אנזימים, תוך צמצום הסיכון לאובדן אינטראקציות חלבון לבנה-חלבון.

אלקטרופורזה היברידית ברורה/כחולה עבור הפרדה וניתוח של שרשרת נשימה מיטוכונדריאלי מערכות-העל

הגנום המיטוכונדריאלי של שמרי בייקר מקודד שמונה פוליפפטידים. מטרת הפרוטוקול הנוכחי היא לתייג את כולם ולאחר מכן לדמיין אותם כקצועות נפרדות.

תיוג והדמיה של מוצרי ביטוי גנום מיטוכונדריאלי ב Cerevisiae שמרים של בייקר

למרות ההתקדמות האחרונה, חלבונים מיטוכונדריאליים שמרים רבים עדיין נשארים עם הפונקציות שלהם לא ידוע לחלוטין. פרוטוקול זה מספק שיטה פשוטה ואמינה כדי לקבוע את לוקליזציה submitochondrial של חלבונים, אשר היה בסיסי עבור הפיהור של הפונקציות המולקולריות שלהם.

הערכה של לוקליזציה של חלבון Submitochondrial ב ניצנים שמרים Saccharomyces cerevisiae

פרוטוקול זה מתאר בדיקה השוואתית, תוך שימוש בפעילויות מורכבות מיטוכונדריאליות CI+CIII ו-CII+CIII בנוכחות או בהיעדר Na+, כדי לחקור את קיומם של מאגרי CoQ פונקציונליים מפולחים חלקית.

רגישות הממברנה המיטוכונדריאלית הפנימית ל-Na+ חושפת בריכות CoQ פונקציונליות מפולחות חלקית

פרוטוקול זה מתאר טכניקה לניתוח של סופרקומפלקסים נשימתיים כאשר רק כמויות קטנות של דגימות זמינות.

בידוד מיטוכונדריה לניתוח סופר-קומפלקס מיטוכונדריאלי מדגימות רקמה קטנה ותרביות תאים 

עבודה זו מסבירה כיצד לשנות מיטוכונדריה של שמרים באמצעות שיטה ביוליסטית. אנו גם מראים כיצד לבחור ולטהר את הטרנספורמנטים וכיצד להציג את המוטציה הרצויה במיקום המטרה בתוך הגנום המיטוכונדריאלי.

טרנספורמציה מיטוכונדריאלית בבייקר

נשימה מיטוכונדריאלית בתאים שלמים של שמרים היא אינדיקטור רב ערך לביו-אנרגטיקה של התאים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול לכימות פנוטיפ זה הרלוונטי למיני שמרים שונים.

כימות נשימה מיטוכונדריאלית בתאי שמרים שלמים

חקור את הרכבת קומפלקסי שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית בשמרי הביקוע Schizosaccharomyces pombe. הפרוטוקול כולל בידוד מיטוכונדריה, SDS-PAGE, BN-PAGE ואימונובלוטינג לניתוח חלבונים.

ניתוח הביטוי והרכבת הקומפלקסים של חלבוני שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית בשמרי הביקוע Schizosaccharomyces pombe

גלה סרטונים נוספים