Summary
نقدم هنا، وضع بروتوكول لإنشاء نموذج الاكتئاب الماوس ومراقبة التغييرات السلوك المرتبطة بالإجهاد المزمن المعتدل لا يمكن التنبؤ بها (CUMS)، وتقييم تأثير المضادة الاكتئاب إكسياوياوسان.
Abstract
بالإضافة إلى استخدام موحدة للأدوية المضادة للاكتئاب والعلاج النفسي، استخدام الطب الصيني التقليدي قد يؤدي إلى حدوث تحسن عام للمرضى الذين يعانون من اضطراب الاكتئاب الرئيسي (MDD). ولذلك، كان الغرض من هذه الدراسة وضع نموذج الاكتئاب الماوس ومراقبة التغييرات السلوك المرتبطة بالإجهاد المزمن المعتدل لا يمكن التنبؤ بها (CUMS) ثم تقييم تأثير المضادة الاكتئاب إكسياوياوسان. وتم تقسيم الفئران عشوائياً إلى أربع مجموعات: مجموعة مراقبة ومجموعة طراز، مجموعة علاج مع إكسياوياوسان، ومجموعة علاج مع فلوكستين. وأبقى على حدة جميع الفئران في أقفاص، والاكتئاب قد يتسبب في الفئران بتعريضها لعدة ألاعيب CUMS مصممة لمدة 21 يوما، كما هو مبين في البروتوكول. الفئران في مجموعة التحكم ومجموعة نموذج تلقت 0.5 مل ماء المقطر، بينما تلقت الفئران في مجموعات العلاج أما إكسياوياوسان (0.25 غ/كغ/يوم) أو فلوكستين (2.6 مغ/كغ/يوم). وأعطيت الأدوية المستخدمة في الدراسة إينتراجاستريكالي يوميا خلال الثلاثة أسابيع كاملة. لتقدير السلوكيات مثل الاكتئاب، مجموعة من المعلمات بما في ذلك الدولة معطف، وزن الجسم، فتح نقاط الاختبار الميداني، وقد سجلت نقاط اختبار التفضيل السكروز. وأظهر تحليل البيانات أن السلوكيات نموذج الفئران التي تم تغييرها إلى حد كبير بالمقارنة مع سلوكيات الفئران في مجموعة التحكم، التي تم تحسينها بمعاملة إكسياوياوسان وفلوكسيتين. النتائج الحالية أثبتت آثار مضادة الاكتئاب إكسياوياوسان على سلوكيات الفئران التي يسببها CUMS، وكشفت عن أن مركبات من الوصفة إكسياوياوسان قد تكون جديرة بالاهتمام لعلاج الاكتئاب، والنظر في آثارها المفيدة على السلوكيات مثل الاكتئاب.
Introduction
MDD مرض عقلية المزمنة والمتكررة جداً أن يعرض مع استمرار تدني الحالة المزاجية، والاكتئاب، وتدني احترام الذات، التخلف العقلي، فقدان الاهتمام، النوم اضطرابات، الاتجاهات تأثيراً عميقا في التشاؤم أو الانتحار؛ أنها تسببت في ضرر كبير على صحة الإنسان وتحقيق الاستقرار الاجتماعي1. فقد أصبح واحداً من العالم السبب الرئيسي للعجز، وقد يكون أحد أهم الأسباب الرئيسية لعبء المرض بحلول عام 2030، وفقا "منظمة الصحة العالمية"2،3. حاليا، تعتبر الأدوية المضادة للاكتئاب والعلاج النفسي لتكون الخيار الأول لعلاج MDD. ومع ذلك، عددا هائلا من المرضى الذين شخصت MDD لا تستجيب للعلاج أو الدواء مستمرة، ويتم سردها كوجود4من الاكتئاب المقاوم للعلاج.
إكسياوياوسان هو كلاسيكية صينية مجمع5 التي تم استخدامها على نطاق واسع لعلاج الأمراض النفسية لآلاف السنين منذ عهد أسرة سونغ في الصين6. وهو يتألف من الأعشاب الصينية 8: بوبليوري الرقم الأساسي، "الرقم الأساسي" بونيا ألبا، "الرقم الأساسي" Angelicae سينينسيس، بوريا، ماكروسيفالاي أتراكتيلوديس ريزوما، جليسيرهيزاي Radix، ريزوما زينجبيرس Recens ، و العود هيربا. إكسياوياوسان يحتوي على مكونات متعددة وله أهداف متعددة، وتستخدم مسارات متعددة7. إكسياوياوسان قد ثبت عموما أن تكون صيغة آمنة وفعالة لعلاج مختلف الأمراض ذات الصلة بالعقلية اضطرابات، وقد ركزت الدراسات الحديثة أيضا على الآلية المضادة الاكتئاب من هذا المجمع8،9، 10. إمراضية MDD حتى الآن غير واضحة، على الرغم من أن هناك فرضيات متنوعة، بما في ذلك فرضية مونوأمين، فرضية مستقبلات الناقل العصبي، فرضية تغيير وظيفة الغدد الصم العصبية، وفرضية الشذوذ المناعي، إلخ. لقد بينت دراسات عديدة أن تأثير مضاد إكسياوياوسان لديه اتصال مع الأسس المادية الفرضيات أعلاه11،12، وفي بيانات العمل العلاجي كتحسين للاكتئاب مثل 13من السلوكيات.
وعلاوة على ذلك، مع انتشار الاكتئاب، عانى المجتمع الحديث من تخفيضات في قوة العمل، والتقاعد المبكر، والعلاجات مكلفة14. تكلفة العلاج يحتاج إلى عناية طبية صارمة، مما يعني طائفة من زيادة التكاليف الطبية وتوقعا دقيقا دقة نتائج غير مرغوب فيها، فضلا عن الآثار الجانبية15. وقد عشب صيني إكسياوياوسان المكونات موجوداً وآثار فريدة من نوعها، وآثار جانبية طفيفة. التطبيق يمكن أن تلعب دوراً في تخفيف العبء على المعالجة الطبية الحديثة. ولذلك، لتوفير أساس نظري أكثر لتطبيق إكسياوياوسان، علاج السريري بديل ينبغي أن تقدم لعلاج الاكتئاب، وحالات الإصابة التي يزيد عاماً بعد عام، وينبغي تحسين صحة الإنسان في نفس الوقت. وتصف هذه الورقة بروتوكول التي تنطوي على استخدام إكسياوياوسان لمنع السلوكيات مثل الاكتئاب بإنشاء نموذج اكتئاب من الماوس. واستخدمت في حقل مفتوح واختبار السكروز الأفضلية للتحقق من آثار إكسياوياوسان المضادة للاكتئاب.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
هذا البروتوكول أقرته لجنة أخلاقيات الحيوان من جامعة بكين "الطب الصيني" ووفقا لجميع المبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية للصين. كان هناك أي حالة الوفاة العرضية أثناء إجراء التجارب، والحيوانات لا تحتاج إلى أن euthanized في هذه الدراسة.
1. إعداد المخدرات للتجربة
ملاحظة: تم شراؤها الأعشاب الصينية وثم مصادقة من قبل الدكتور ليو باء بجامعة بكين "الطب الصيني". إكسياوياوسان يحتوي على الأدوية الصينية التقليدية الثمانية التالية في نسبة 6:6:6:6:3:6:2:2: "الرقم الأساسي" Angelicae سينينسيس، وألبا بونيا "الرقم الأساسي"، بوريا، بوبليوري الرقم الأساسي، جليسيرهيزاي الرقم الأساسي، ماكروسيفالاي أتراكتيلوديس ريزوما، العود هيربا وريزوما زينجبيرس ريسينس،.
- إعداد إكسياوياوسان كما هو موضح سابقا16.
ملاحظة: يمكننا استخراج هذه المركبات في غرفة إعداد الطب الصيني في مستشفى الصداقة الصينية اليابانية، وعائد استخراج 18.8 في المائة. - التحقق من جودة إكسياوياوسان كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء-الكتلي التحليل (LC-MS/MS)17.
2-إعداد الفئران للإجراء التجريبي
ملاحظة: الإجراء التجريبي، 60 الفئران C57BL/6J صحية الذكور الذين تتراوح أعمارهم بين 12 أسبوعا واختيرت، مع الماوس كل وزنها بين 18 و 22 g.
- تبقى الفئران منفردة في أقفاص في غرفة حيوانات مختبرية ممرض محددة مجاناً (SPF) نموذجية (22 ± 1 درجة مئوية، ودورة ح 12/12 ح الظلام/الضوء، الرطوبة النسبية: 30-40%) لمدة أسبوع واحد قبل الإجراء CUMS.
- تقسيم جميع الفئران عشوائياً إلى مجموعة مراقبة، ومجموعة نموذجية، مجموعة علاج إكسياوياوسان، أو مجموعة علاج فلوكستين وفقا لوزن الجسم. تحتوي كل مجموعة 15 الفئران.
- قبل البدء بالتجربة، عدد الفئران في كل مجموعة على ذيل استخدام قلم تمييز.
- اختبار جميع الفئران باستخدام اختبار تفضيل سكروز خمسة أيام (راجع الخطوة 5) وإجراء اختبار حقل مفتوح (راجع الخطوة 6).
3-تنظيم دورات تعريفية للاكتئاب في الفئران
ملاحظة: للحث على الاكتئاب، خضع الفئران في المجموعة النموذجية، ومجموعتين من العلاج CUMS لمدة 21 يوما18. يمكن تغيير الخطة حسب الحالة العملية، ولكن ينبغي أن يتبع مبدأ أن الضغوطات نفسه لا يمكن استخدامها بشكل مستمر.
-
تعرض الفئران يوميا لأي اثنين من الضغوطات السبعة التالية ل19من 21 يوما على التوالي. وتهدف الخطة النمذجة لدينا كما يلي:
- يوم الاثنين، تعرض الفئران للحرمان من الطعام (فارغ التغذية لكل قفص ح 24، 08:00 ص إلى 08:00 ص) والحرمان من الماء (إزالة زجاجة مياه الشرب لكل قفص ح 24، 08:00 ص إلى 08:00 ص).
- يوم الثلاثاء، كشف الفئران إلى ضبط النفس الإجهاد (كبح جماح الفئران في حوض بلاستيكية صغيرة ل 3 ح، 08:00 ص إلى 11:00 ص) واقفاص فارغة (إزالة الحشو في كل قفص ح 11، 08:00 ص إلى الساعة 19:00).
- يوم الأربعاء، تعرض الفئران في أقفاص الرطب والمتسخة (صب الماء في كل قفص وإبقاء الرطب ح 24، 08:00 ص إلى 08:00 ص) ومزدحمة أقفاص (وضع خمسة فئران في قفص واحد ح 24، 08:00 ص إلى 08:00 صباحا).
- يوم الخميس، تعرض الفئران لضبط النفس الإجهاد والسباحة المثلج20،21 (قوة كل من الماوس للسباحة في حوض السمك زجاج الشفاف مع الماء المثلج لمدة 5 دقائق).
- يوم الجمعة الماضي، تعرض الفئران في أقفاص الرطب والمتسخة، والحرمان من الطعام.
- يوم السبت، تعرض الفئران لضبط النفس الإجهاد واقفاص مزدحمة.
- يوم الأحد، تعرض الفئران في أقفاص فارغة والسباحة المثلج.
- سجل شعار الدولة ووزن الجسم أسبوعيا حتى نهاية النمذجة (يوم 21). حساب النتيجة الإجمالية للدولة معطف كمجموع لعشرات من سبعة أجزاء الجسم المختلفة: الرأس والرقبة ومعطف الظهرية، معطف البطني، فوريباوس، والذيل وآثار أقدام هند. درجة واحدة تشير إلى معطف مهندم، ويشير إلى درجة الصفر معطف غير مهذب22.
- إجراء اختبار تفضيل سكروز خمسة أيام (راجع الخطوة 5) وإجراء اختبار حقل مفتوح (راجع الخطوة 6) في نهاية التجربة.
4-إدارة شؤون إكسياوياوسان
ملاحظة: جرعة إكسياوياوسان (0.25 غ/كغ/يوم) واختيرت على أساس كفاءته مرضية كما هو موضح سابقا9.
- أثناء التجربة، استخدام الماء المقطر لإعداد تعليق إكسياوياوسان وفلوكستين، والتأكد من استخدامها على الفور.
- إعطاء 0.5 مل ماء المقطر للفئران في مجموعة التحكم ومجموعة نموذج الإدارة إجراء كل يوم قبل النمذجة. وفي الوقت نفسه، إعطاء إكسياوياوسان (0.25 غ/كغ/يوم) أو فلوكستين (2.6 مغ/كغ/يوم) للفئران في مجموعات معاملة اثنين.
5-السكروز تفضيل الاختبار
ملاحظة: تم تطبيق لا الحرمان المياه أو الطعام قبل الاختبار. وأجرى البروتوكول كما ذكر سابقا23.
- في اليومين الأول والثاني، بيت الفئران على حدة مع اثنين من زجاجات مليئة بماء الصنبور.
- في اليومين المقبلين، إعطاء الفئران اثنان زجاجات مليئة بمحلول السكروز 1%.
- في اليوم الأخير، إعطاء الفئران زجاجتين ح 24 وواحد بماء الصنبور والآخر مع محلول السكروز 1%. للقضاء على تفضيل جانب من الفئران في الشرب السلوك، تبديل موضع زجاجتين بعد 12 ساعة.
- سجل الحجم (mL) من محلول السكروز المستهلكة ومياه الحنفية. حساب تفضيل السكروز كما يلي: تفضيل السكروز (%) = الاستهلاك السكروز إلى مجموع استهلاك السائل × 100%.
6-فتح مجال الاختبار
- إجراء اختبار حقل مفتوح في غرفة مضاءة خافتة وهادئة مع رباعي أسود والارجنين صندوق خشبي. القسمة العطس إلى مربعات متساوية 25 خطوط زرقاء.
- تنظيف المربع الحقول المفتوحة مع الكحول 5% قبل الوصول كل الماوس. ثم، ضع الماوس في وسط ميدان مفتوح بلطف.
- تعليق من عالية الوضوح كاميرا رقمية حوالي 200 سم الحق فوق الحقل، وتسجيل سلوك كل الماوس لمدة 5 دقائق.
- تقييم الفيديو السلوكية الفئران عن طريق برامج فيديو-تتبع النظام وتسجيل بيانات مجموع تشغيل المسافة وعدد حالات الدخول إلى منطقة المركز.
- تحليل البيانات نقل المسافة الإجمالية وعدد حالات الدخول إلى منطقة مركز بالبرمجيات الإحصائية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
علما بأن النتائج التي صدرت سابقا بالدكتور شيوى-فانغ دينغ، et al. 18
وأعرب عن البيانات ك ± يعني الخطأ المعياري للوسط (SEM). واستخدمت ANOVA أحادي اتجاه أو اختبار غير حدودي للبيانات العامة استناداً إلى اختبار الحياة الطبيعية واختبار تجانس التباين. تم استخدام اختبار LSD للمقارنات بين المجموعات. وبالإضافة إلى ذلك، استخدمت عملية القياس المتكرر للنموذج الخطي العام (GLM) لإجراء تحليل ANOVA أحادي الاتجاه للبيانات المقاسة المتكررة (معطف درجة ووزن جسم)، وعملية تحليل متعدد المتغيرات للتباين واعتمد إجراء مقارنات بين المجموعات في كل وقت نقطة (LSD الأسلوب).
الحالة المادية للفئران التي يسببها CUMS
بعد تعريض الفئران إلى ثلاثة أسابيع CUMS لتحريض اكتئاب، حملت ضمور تدريجي لشعار الدولة في المجموعة النموذجية؛ الضمور ولم يقدم بعد أسبوعين إجهاد، بل أنها ازدادت سوءا في نهاية الإجراء CUMS (ثلاثة أسابيع)، والنتيجة معطف انخفض إلى حد كبير مقارنة بمجموعة التحكم (F (3، 56) = 25.08، ف = 0.000). الدولة معطف من الفئران لا سيما تحسنت بعد العلاج المستمر مع إكسياوياوسان أو فلوكستين مقارنة بالمجموعة النموذجية (F (3، 56) = 25.08، سواء ف = 0.001، الشكل 1a). وفقا للبيانات وزن الجسم أسبوعية لكل مجموعة، وانخفاض كبير في وزن الجسم تجلى الأسبوع الثالث (F (3، 56) = 16.149، ف = 0.000، الشكل 1b)، في حين أن العلاج إكسياوياوسان أو فلوكستين زيادة كبيرة في الجسم الوزن مقارنة مع مجموعة نموذج (F (3، 56) = 16.149، كلا p = 0.001).
اختبار التفضيل السكروز
قبل التعرض للإجهاد، الفئران في جميع الفئات وكان تفضيل سكروز مماثلة (خط الأساس، الشكل 2 ألف). ومع ذلك، لوحظ انخفاض كبير في تفضيل السكروز بعد ثلاثة أسابيع من التوتر الداخلي في مجموعة نموذج (F (3، 56) = 41.379، ف = 0.000، الشكل 2). العلاج إكسياوياوسان وفلوكستين فعالية عكس هذه التغييرات وزيادة كبيرة في تفضيل السكروز مقارنة مع مجموعة نموذج (F (3، 56) = 41.379، سواء ف = 0.000).
اختبار حقل مفتوح
قبل التعرض للإجهاد، أظهرت الفئران كل دولة سلوكية مماثلة (ظروف خط الأساس. الشكل 2 (ج) و 2d). ومع ذلك، اختلفت بعد التعرض للضغط لمدة ثلاثة أسابيع، المسافة الإجمالية في خمس دقائق إلى حد كبير بين المجموعات. المسافة الإجمالية التي تنقل بالفئران في المجموعة النموذجية كان أقل بكثير (F (3، 56) = 4.216، ف = 0، 003، الشكل 2 واو) مقارنة بمجموعة التحكم. وعلاوة على ذلك، كان عدد الإدخالات في المنطقة الوسطى أيضا تختلف اختلافاً كبيرا بين المجموعات. تناقص عدد الإدخالات في المنطقة الوسطى من المجموعة النموذجية (F (3، 56) = 2.809، ف = 0.013، الشكل 2e) مقارنة مع مجموعة التحكم. علاج فلوكستين منعت هذه التغييرات في اتجاه الحركة، وتحسنت بشكل ملحوظ المسافة الإجمالية وعدد الإدخالات في المنطقة الوسطى (F (3، 56) = 4.216، p = 0.029؛ و (3، 56) = 2.809، p = 0.004). ولوحظ ظاهرة مماثلة أيضا في المجموعة المعالجة إكسياوياوسان (و (3، 56) = 4.216، ف = 0.014؛ و (3، 56) = 2.809، p = 0.029).
الشكل 1 : آثار إكسياوياوسان على التغييرات المستحثة CUMS في الحالة المادية الفئران. الفئران معطف الدولة (أ) و (ب) تم قياس وزن الجسم أسبوعيا خلال فترة الإجهاد. وأعرب عن بيانات يعني ± ووزارة شؤون المرأة، n = 15 كل مجموعة. ** ف < 0.001 مقابل المراقبة؛ ΔΔ ف < 0.001 مقابل النموذج. وقد تم تعديل هذا الرقم من دينغ, et al. 18 الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2 : آثار إكسياوياوسان على السلوكيات مثل الاكتئاب الناجم عن CUMS. وأجرى بطارية اختبارات السلوكية، وتم قياس البارامترات التالية: انتقل السكروز الأفضلية (أ، ب) وعدد حالات الدخول إلى منطقة مركز (ج وه)، والمسافة الإجمالية (النشاط الحركي) (د، و). وأعرب عن بيانات يعني ± ووزارة شؤون المرأة، n = 15 كل مجموعة. * ف < 0.05وف < 0.01 * *ف < 0.001 مقابل السيطرة؛ Δ ف < 0.05 و ΔΔف < 0.01 ΔΔΔف < 0.001 مقابل نموذج. وقد تم تعديل هذا الرقم من دينغ, et al. 18 الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
CUMS النموذج المستخدم في هذه الدراسة طريقة شائعة لإنشاء نموذج استهداف الإجهاد للاكتئاب24. ويمكن استعادة معظم مظاهر CUMS بالعقاقير المضادة للاكتئاب، الذي أشار إلى أن هذا الأسلوب النموذجي له صحة تنبؤية قوية25. بهذه الطريقة، الحيوانات تلقي المزمنة المحفزات مرهقة لا يمكن التنبؤ بها ووضع الأساسية أعراض الاكتئاب الرئيسية، بما في ذلك تكييف تفضيل المكان المنخفض و anhedonia والسلوكيات مثل العاطفة البصر26. هنا، في هذا البروتوكول، يمكن تحسين الاستخدام المستمر إكسياوياوسان أو فلوكستين السلوكيات مثل الاكتئاب الفئران المستحثة CUMS النموذجي وفقا للنتائج التي تم الحصول عليها في هذه التجربة؛ فلوكستين كدواء تحكم إيجابي لإثبات أثر تدخل من إكسياوياوسان.
نقاط تقييم معطف، خلافا لفتح الحقل اختبار، أجبر اختبار السباحة، أو الجدة قمعت تغذية الاختبار، هو تدبير لم يقترن بالاكتئاب في البشر ولكن هو الأسلوب الأكثر انتشارا وموثوق بها وتم التحقق من صحتها جيدا لنموذج الاكتئابي 27من الماوس. في هذه الدراسة، ضمور تدريجي الدولة معطف في المجموعة النموذجية حملت ولم يقدم بعد أسبوعين التوتر بل ازدادت سوءا في نهاية الإجراء CUMS (ثلاثة أسابيع)، حين لا تختلف اختلافاً كبيرا بين المجموعات بعد وزن الجسم أسبوع واحد من التعرض للإجهاد. بيد أن اختلاف وزن الجسم في كل مجموعة بدأ في الظهور بعد النمذجة لمدة أسبوعين، مما أدى إلى انخفاض لاحقة في نهاية مدة ثلاثة أسابيع. وتبين النتائج أنه يمكن عكس هذه التغييرات في الحالة المادية للفئران التي يسببها CUMS بالعلاج إكسياوياوسان وفلوكستين، مما يوحي بأن إكسياوياوسان يمكن أن تحسن الدول المادية من الفئران الاكتئاب.
للمزيد من التحقق من صحة النموذج CUMS والتحقق من تأثير المجمع المستخدمة في هذا البروتوكول، استخدمت اختبار تفضيل سكروز وإجراء اختبار حقل مفتوح لتقييم السلوكيات اكتئاب ممكن في الفئران التي يسببها CUMS. تخفيض أنهيدونيا في تفضيل السكروز كان يستخدم لتقييم حالة مثل الاكتئاب في القوارض، بينما اختبار حقل مفتوح، كاختبار نفسية حيوانية، ويستخدم عادة لتقييم الوظيفة الحركية والانفعالية للقوارض28. وأظهرت النتيجة أن 3 أسابيع تعرض للإجهاد كان له تأثير واضح على تفضيل السكروز من الفئران، وانعكس في أنهيدونيا بالعلاجات إكسياوياوسان وفلوكسيتين. اختبار حقل مفتوح يستخدم عادة لتقييم الوظيفة الحركية والانفعالية في الحيوانات المختبرية29. في هذه الدراسة، تم استخدامه لتحليل السلوك الاكتئابي. وأظهرت نتائج الاختبار فتح الحقل أن المسافة الإجمالية التي تنقل بالفئران في مجموعة نموذج كان أقل إلى حد كبير من السيطرة على المجموعة. وعلاوة على ذلك، كان عدد الإدخالات في المنطقة الوسطى بمجموعة نموذجية من الفئران أقل بكثير من مجموعة العلاج من الفئران، مما يوحي بأن الفئران التي يسببها CUMS عرض السلوكيات مثل الاكتئاب. وأظهرت الدراسة أيضا أن إكسياوياوسان وفلوكستين يمكن التخفيف من التغييرات التي عرضت في الاختبار الميداني مفتوحة.
وأظهرت هذه الورقة باﻻتفاق مع نتائج مماثلة ناقشت في دراسات سابقة، أن CUMS يسبب انخفاض في استهلاك السكروز والنشاط الحركي. وكان الاستخدام المستمر إكسياوياوسان فعالة للوقاية والعلاج من الاكتئاب الناجم عن CUMS في الفئران. العديد من الدراسات قد فحص الاكتئاب، فهم متقدمة من طراز الحيوان يمكن أن يكون المفتاح لتوضيح إليه الاكتئاب30. يمكن عرض الأسلوب CUMS الموصوفة في هذا البروتوكول فعلياً حالة الاكتئاب الفئران. على عكس الإجهاد المزمن المعتدل (CMS) أو تجميد المزمن الإجهاد (رابطة الدول المستقلة) الأسلوب31،32، النقطة الرئيسية ل CUMS تكمن في اختيار الضغوطات لا يمكن التنبؤ بها، وتطبيق نموذج التقييم العقلاني. كذلك تأكيد الأسلوب والنتيجة المبينة في هذا البروتوكول، ينبغي أن يشمل العمل في المستقبل اختيار المزيد من الضغوطات وأساليب التقييم للأسلوب CUMS، والكشف عن الآثار الطويلة الأجل من إكسياوياوسان لمدة 28-48 يوما CUMS.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
هذا البحث وأيده المنح المقدمة من الوطنية الطبيعية مؤسسة العلوم الصينية (رقم 81630104؛ ورقم 81473597)، وأموال البحوث الأساسية للجامعات المركزي (رقم 2018-جيبز-XS005). البروتوكول والنتائج أظهرت في هذه الورقة التي تنبع من المقالة مشاركة تطبيع الدبقية فيبريلاري الحمضية البروتين التعبير في هيبوكامبي في "آثار إكسياوياوسان أنتيديبريسانتليكي" على "شكل مزمن الفئران أكد" الدكتور. شيوى-فانغ دينغ، et al.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chinese Herbs | Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company | - | The drugs were extracted by the Chinese medicine preparation room of the China-Japan Friendship Hospital, distilled water was used to prepare the suspension of Xiaoyaosan, and the dose was 0.25 g/kg/d. |
| Fluoxetine | PATHEON FRANCE | 5545A | The distilled water was used to prepare the suspension of fluoxetine, and the dose 2.6 mg/kg/d. |
| C57BL/6j mice | Beijing Vital River of the Charles River Company | SCXK 2011-0004 | 60 healthy male C57BL/6J mice aged 12 weeks were purchased from Beijing Vital River of the Charles River Company. |
| Mouse cage | Styling Biotechnology | 34853016 | 318×202×135 mm |
| Distilled Water | - | - | The water was used througout the experiment. |
| Sucrose | Sigma | - | The sucrose was used in the sucrose preference test to prepare 1% sucrose solution. |
| ACS-2EAS Electronic Balance | Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd. | - | It was used to weigh the avoirdupois of mice at different stages. |
| Wooden Black Lusterless Box | - | - | (40 cm x 40 cm x 15 cm), divided into 25 equal squares by blue lines. |
| WV-CP470 Camera | Panasonic, Japan | - | A HD digital camera which was used for recording the whole process of the open field test. |
| Etho Vision 3.0 Software | Noldus, Wageningen, Holland | - | A video-tracking system which was used to evaluate the locomotor function and emotionality of mice. |
| SPSS Statistics 21.0 Software | IBM | - | SPSS 21.0 software was used to analyze the data, one-way ANOVA or non-parametric test was used for general data based on normality test and homogeneity test for variance, and LSD method was adopted for the comparisons between groups. |
| Graphpad Prism 6.0 Software | Graphpad Software,Inc.USA | - | Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs. |
References
- Chrousos, G. P., Gold, P. W. The concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis. JAMA. 267 (9), 1244-1252 (1992).
- Yao, Y., Huang, H. Y., Yang, Y. X., Guo, J. Y. Cinnamic aldehyde treatment alleviates chronic unexpected stress-induced depressive-like behaviors via targeting cyclooxygenase-2 in mid-aged rats. Journal of Ethnopharmacology. 162, 97-103 (2015).
- Murray, C. J., Lopez, A. D. Global health statistics: a compendium of incidence prevalence and mortality estimates for over 200 conditions. World Health Organization Harvard School of Public Health World Bank. , ii (1996).
- Sackeim, H. A. The definition and meaning of treatment-resistant depression. Journal of Clinical Psychiatry. 62 (16), 10-17 (2001).
- Li, W., et al. The effect of compounds of soothing liver, invigorating spleen, tonifying kidney on the praxiology and immunological function of chronic immobilization stressed rats. Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica. 11, 33-37 (2003).
- Meng, Z. Z., Chen, J. X., Jiang, Y. M., Zhang, H. T. Effect of Xiaoyaosan Decoction on Learning and Memory Deficit in Rats Induced by Chronic Immobilization Stress. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2013 (17), 297154 (2013).
- Zhao, H., Wan, X., Chen, J. X. A mini review of traditional Chinese medicine for the treatment of depression in China. American Journal of Chinese Medicine. 37 (02), 207-213 (2009).
- Gao, X., et al. Metabonomic study on chronic unpredictable mild stress and intervention effects of Xiaoyaosan in rats using gas chromatography coupled with mass spectrometry. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 690-699 (2011).
- Li, P., et al. CNP signal pathway up-regulated in rectum of depressed rats and the interventional effect of Xiaoyaosan. World Journal of Gastroenterology. 21 (5), 1518 (2015).
- Li, X. J., et al. Xiaoyaosan exerts anxiolytic-like effects by down-regulating the TNF-α/JAK2-STAT3 pathway in the rat hippocampus. Scientific Reports. 7 (1), 353 (2017).
- Jun-Sheng, T., et al. Dynamic analysis of the endogenous metabolites in depressed patients treated with TCM formula Xiaoyaosan using urinary (1)H NMR-based metabolomics. Journal of Ethnopharmacology. 158, 1-10 (2014).
- Dai, Y., et al. Metabolomics study on the anti-depression effect of xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 128 (2), 482-489 (2010).
- Zhou, Y., et al. Antidepressant-like effects of the fractions of Xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 236-244 (2011).
- Wang, P. S., et al. The Costs and Benefits of Enhanced Depression Care to Employers. Archives of General Psychiatry. 63 (12), 1345-1353 (2006).
- Pirraglia, P. A., Rosen, A. B., Hermann, R. C., Olchanski, N. V., Neumann, P. Cost-utility analysis studies of depression management: a systematic review. American Journal of Psychiatry. 161 (12), 2155-2162 (2004).
- Wang, S. X., et al. Xiaoyaosan Decoction Regulates Changes in Neuropeptide Y and Leptin Receptor in the Rat Arcuate Nucleus after Chronic Immobilization Stress. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. 2012 (4), 381278 (2012).
- Zhu, X., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of β-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus. Evidence-based Complementary and Alternative. 2014, (2014).
- Ding, X. F., et al. Involvement of Normalized Glial Fibrillary Acidic Protein Expression in the Hippocampi in Antidepressant-Like Effects of Xiaoyaosan on Chronically Stressed Mice. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2017, 1960584 (2017).
- Ding, X. F., et al. Involvement of the glutamate/glutamine cycle and glutamate transporter GLT-1 in antidepressant-like effects of Xiao Yao san on chronically stressed mice. BMC Complementary & Alternative Medicine. 17 (1), 326 (2017).
- Murua, V. S., Gomez, R. A., Andrea, M. E., Molina, V. A. Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress: reversal by imipramine administration. Pharmacol Biochem Behav. 38 (1), 125 (1991).
- Duan, J. J., et al. Pharmacokinetics of 5-fluorouracil and cyclophosphamide in depression rats. European Review for Medical & Pharmacological Sciences. 16 (4), 427-436 (2012).
- Cao, X., et al. Astrocyte-derived ATP modulates depressive-like behaviors. Science Foundation in China. 19 (1), 56 (2013).
- Kirshenbaum, G. S., et al. Decreased neuronal Na+, K+ -ATPase activity in Atp1a3 heterozygous mice increases susceptibility to depression-like endophenotypes by chronic variable stress. Genes Brain & Behavior. 10 (5), 542-550 (2011).
- Liu, X. J., et al. Urinary metabonomic study using a CUMS rat model of depression. Magnetic Resonance in Chemistry. 50 (3), 187-192 (2012).
- Zhu, S., et al. Unpredictable chronic mild stress induces anxiety and depression-like behaviors and inactivates AMP-activated protein kinase in mice. Brain Research. 1576, (2014).
- Yang, C., Wang, G., Wang, H., Liu, Z., Wang, X. Cytoskeletal alterations in rat hippocampus following chronic unpredictable mild stress and re-exposure to acute and chronic unpredictable mild stress. Behavioural Brain Research. 205 (2), 518-524 (2009).
- Ding, X. F., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behaviors in Rats with Chronic Immobilization Stress through Modulation of Locus Coeruleus-Norepinephrine System. Evidence-Based Complementary and Alternative. , 605914 (2014).
- Wu, L. L., et al. Antidepressant-Like Effects of Fractions Prepared from Danzhi-Xiaoyao-San Decoction in Rats with Chronic Unpredictable Mild Stress: Effects on Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis, Arginine Vasopressin, and Neurotransmitters. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2016 (3), 1-11 (2016).
- Stanford, S. C. The Open Field Test: reinventing the wheel. Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134 (2007).
- Zeldetz, V., et al. A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats. Journal of Visualized Experiments. (132), e57137 (2018).
- Willner, P. Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS. Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).
- Wood, G. E., Norris, E. H., Waters, E., Stoldt, J. T., Mcewen, B. S. Chronic immobilization stress alters aspects of emotionality and associative learning in the rat. Behavioral Neuroscience. 122 (2), 282-292 (2008).
