Summary
Vi præsenterer her, en protokol for at etablere depressive musemodel, observere adfærd ændringer forbundet med kronisk uforudsigelige mild stress (CUMS) og evaluere den anti-depressiv effekt af Xiaoyaosan.
Abstract
Ud over de standardiserede brug af antidepressiv medicin og psykoterapi har brugen af traditionel kinesisk medicin ført til en generel forbedring af patienter med depression (MDD). Formålet med denne undersøgelse var derfor, at etablere depressive musemodel, observere adfærd ændringer forbundet med kronisk uforudsigelige mild stress (CUMS), og derefter vurdere den anti-depressiv effekt af Xiaoyaosan. Mus var tilfældigt inddelt i fire grupper: en kontrolgruppe, en modelgruppe, en behandling gruppe med Xiaoyaosan og en behandling gruppe med fluoxetin. Alle mus blev individuelt holdt i bure, og depression blev induceret i mus ved at udsætte dem for flere designede manipulationer af CUMS i 21 dage, som beskrevet i protokollen. Musene i kontrolgruppen og modelgruppe modtaget 0,5 mL destilleret vand, mens mus i grupperne behandling modtaget enten Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) eller fluoxetin (2,6 mg/kg/dag). De lægemidler, der anvendes i undersøgelsen fik intragastrically dagligt i de hele tre uger. At vurdere de depressive-lignende adfærd, en række parametre, herunder tilstanden frakke, kropsvægt, åbne felt test score, og saccharose præference test score blev registreret. Dataanalyse viste, at adfærd af model mus blev ændret sig betydeligt i forhold til adfærd af musene i kontrolgruppen, som blev forbedret ved behandling af Xiaoyaosan og fluoxetin. De nuværende resultater viste anti-depression virkningerne af Xiaoyaosan på opførsel af CUMS-induceret mus og afslørede, at forbindelser fra Xiaoyaosan recept kan være nyttigt til behandling af depression, overvejer deres gavnlige effekt på depressive-lignende adfærd.
Introduction
MDD er en kronisk, højt tilbagevendende mental sygdom at præsenterer med vedvarende lav humør, depression, lavt selvværd, mental retardering, tab af interesse, søvnforstyrrelser, dybt pessimistisk eller suicidale tendenser; Det har forårsaget stor skade på menneskers sundhed og sociale stabilisering1. Det er blevet en af verdens primære årsag til handicap, og det kan være en af de største førende årsager til sygdomsbyrden i 2030 ifølge World Health Organization2,3. I øjeblikket, antidepressiv medicin og psykoterapi er anset for at være det første valg til behandling af MDD. Ikke desto mindre et enormt antal patienter med diagnosen MDD reagerer ikke på kontinuerlig medicin eller terapi, og de er opført som havende behandling-resistent depression4.
Xiaoyaosan er en klassisk kinesisk sammensatte-5 , der har været meget anvendt til behandling af psykiske sygdomme i tusinder af år siden Song-dynastiet i Kina6. Det består af 8 kinesiske urter: Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Radix Angelicae Sinensis, Henrik, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Zingiberis Recens , og Herba Menthae. Xiaoyaosan indeholder flere vælgere, har flere mål og udnytter flere veje7. Xiaoyaosan har ofte vist sig at være en sikker og effektiv formel til behandling af forskellige sygdomme relateret til psykiske lidelser, og moderne undersøgelser har også fokuseret på den anti-depressiv mekanisme af dette sammensatte8,9, 10. Patogenesen af MDD er endnu uklart, selv om der er mangeartede hypoteser, herunder monoamin hypotese, neurotransmitter receptor hypotese, neuroendokrine funktion ændre hypotese, immunsystemet abnormitet hypotese, etc. Flere undersøgelser har vist, at den antidepressive effekt af Xiaoyaosan har en forbindelse med det materielle grundlag for de ovenstående hypoteser11,12, og dens terapeutiske virkning manifester som en forbedring til depressive-lignende adfærd13.
Desuden med forekomsten af depression, har moderne samfund lidt fra nedskæringer i arbejdsstyrken, førtidspensioneringer og dyre behandlinger14. Dyre behandling brug for strenge lægehjælp, hvilket betyder en række større medicinske omkostninger og præcise foregribelse af præcise uønskede resultater samt bivirkninger15. Den kinesiske urt Xiaoyaosan har tilgængelige komponenter, unikke effekter og mindre bivirkninger. Dens anvendelse kan spille en rolle i at mindske byrden af moderne medicinsk behandling. Derfor, for at give et mere teoretisk grundlag for anvendelsen af Xiaoyaosan, en alternativ klinisk behandling bør tilbydes til behandling af depression, forekomsten af hvilke stiger år for år, og bør forbedre menneskers sundhed på samme tid. Dette papir beskriver en protokol, der involverer brugen af Xiaoyaosan til at forhindre den depressive-lignende opførsel ved at etablere den depressive model af musen. Open field test og saccharose præference test blev brugt til at efterprøve de antidepressive virkninger af Xiaoyaosan.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Denne protokol blev godkendt af det animalske etiske udvalg af Beijing University of kinesisk medicin og var i overensstemmelse med alle retningslinjer for pleje og brug af laboratoriet dyr i Kina. Der var ingen hændelig død situation under den eksperimenterende procedure, og ingen dyr måtte aflives i denne undersøgelse.
1. forberede forsøget til narkotika
Bemærk: De kinesiske urter blev købt og derefter godkendt af Dr. B. Liu af Beijing University of kinesisk medicin. Xiaoyaosan indeholder den følgende otte traditionelle kinesisk medicin i et forhold på 6:6:6:6:3:6:2:2: Radix Angelicae Sinensis, Radix Paeoniae Alba, Henrik, Radix Bupleuri, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Herba Menthae og Rhizoma Zingiberis Recens.
- Forberede Xiaoyaosan som tidligere beskrevet16.
Bemærk: Vi udtrak disse forbindelser i kinesisk medicin forberedelse værelse af Kina-Japan venskab Hospital, og udvinding udbyttet var 18,8%. - Kontrollere kvaliteten af Xiaoyaosan af high-performance liquid chromatography-massespektrometri analyse (LC-MS/MS)17.
2. forberedelse mus af forsøgsmetoden
Bemærk: For forsøgsmetoden, 60 raske mandlige C57BL/6J mus alderen 12 uger blev udvalgt, med hver mus vejer mellem 18 og 22 g.
- Holde mus individuelt i bure i en typisk specifikke patogen gratis (SPF) laboratorium animalsk værelse (22 ± 1 ° C, 12 h/12 h mørk/lys cyklus, relativ luftfugtighed: 30 – 40%) i en uge før proceduren CUMS.
- Tilfældigt opdele alle mus i en kontrolgruppe, en modelgruppe, en Xiaoyaosan behandling gruppe eller en fluoxetin behandling gruppe ifølge deres kropsvægt. Hver gruppe har 15 mus.
- Før igangsætning af eksperimentet, er flere mus hver gruppe på halen ved hjælp af en mærkning pen.
- Teste alle mus ved hjælp af en fem-dages saccharose præference test (Se trin 5) og en åben field test (Se trin 6).
3. induktion af Depression i mus
Bemærk: For at fremkalde depression, mus i modelgruppen og to behandlingsgrupper gennemgik CUMS for 21 dage18. Planen kan blive ændret afhængigt af den konkrete situation, men det princip, at den samme stressor kan anvendes kontinuerligt bør følges.
-
Udsætte mus dagligt til enhver to af følgende syv stressfaktorer for 21 på hinanden følgende dage19. Vores modellering plan er designet som følger:
- På mandag, udsætte mus til mad afsavn (Tom feed af hvert bur for 24 h, 08:00:00 til 8:00) og vand afsavn (Fjern hvert bur for 24 h, 08:00:00 til 8:00 drikke flaske).
- På tirsdag, udsætte mus til tilbageholdenhed stress (begrænse mus i en lille plastik badekar til 3 h, 08:00:00 til 11:00) og Tom bure (Fjern polstring i hvert bur til 11 h, 08:00:00 til 19:00).
- Onsdag, udsætte mus til vådt og snavset bure (hæld vand i hvert bur og holde våde for 24 h, 08:00:00 til 8:00) og overfyldte bure (sætte fem mus i et bur for 24 h, 08:00:00 til 8:00).
- På torsdag, udsætte mus til tilbageholdenhed stress og iskold svømning20,21 (kraft hver mus til at svømme i et klart glas akvarium med isvand for 5 min).
- På fredag, udsætte mus til vådt og snavset bure og mad afsavn.
- På lørdag, udsætte mus til tilbageholdenhed stress og overfyldte bure.
- På søndag, udsætte mus til Tom bure og iskold svømning.
- Optage frakke stat og kropsvægt ugentligt indtil udgangen af modellering (dag 21). Beregne den samlede score stats frakke som summen af noder fra syv forskellige kropsdele: hoved, hals, dorsale frakke, ventrale pels, forepaws, hale og bagpoterne. En score på en angiver en velplejet pels, og en score på nul angiver en usoigneret frakke22.
- Udføre en fem-dages saccharose præference test (Se trin 5) og en åben field test (Se trin 6) i slutningen af forsøget.
4. administration af Xiaoyaosan
Bemærk: Dosis af Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) blev valgt på grundlag af dens tilfredsstillende effekt som tidligere beskrevet9.
- Under eksperimentet, skal du bruge destilleret vand til at forberede Xiaoyaosan og fluoxetin suspensioner, og sørg for at bruge den samme.
- Give 0,5 mL destilleret vand til musene i kontrolgruppen og modelgruppe af gastrisk administration hver dag før modellering. I mellemtiden, give Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dag) eller fluoxetin (2,6 mg/kg/dag) til mus i to behandlingsgrupper.
5. saccharose præference Test
Bemærk: Ingen vand eller mad afsavn blev anvendt før prøven. Protokollen blev udført som tidligere rapporteret23.
- På de første to dage, hus mus individuelt med to flasker fyldt med vand fra hanen.
- På de næste to dage, give musene to flasker fyldt med 1% rørsukkeropløsning.
- På den sidste dag, give musene to flasker for 24 h, en med vand fra hanen og den anden med 1% rørsukkeropløsning. Hvis du vil fjerne en side præference af mus i drikke adfærd, skifte stilling af de to flasker efter 12 timer.
- Optage volumen (mL) af både forbrugt rørsukkeropløsning og vand fra hanen. Beregne saccharose præference som følger: saccharose præference (%) = saccharose forbrug/total flydende forbrug × 100%.
6. open Field Test
- Udføre open field test i et svagt oplyste og roligt værelse med en fire-sidet sort lusterless trækasse. Opdele gulvet i 25 lige kvadrater af blå linjer.
- Rengøre boksen open-felt med 5% alkohol før adgang i hvert mus. Derefter placere musen i midten af feltet åben forsigtigt.
- Suspendere en high definition digital kamera ca 200 cm lige over feltet, og optage funktionen af hver mus i 5 min.
- Evaluere mus adfærdsmæssige video video-tracking system software og registrere data for den samlede afstand og antallet af poster i zonen center.
- Analysere data i den samlede distance flyttet og antallet af poster i zonen center af statistisk software.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Bemærk, at resultaterne har været tidligere udgivet af Dr. Xiu-Fang Ding, et al. 18
Data blev udtrykt som gennemsnit ± standard fejl af middelværdien (SEM). En en-vejs ANOVA eller en ikke-parametrisk test blev anvendt til generelle data baseret på normalitet-test og test for homogenitet af varians. LSD test blev anvendt til sammenligninger mellem grupper. Derudover gentagen måling proces af den generelle lineære model (GLM) blev brugt til at foretage en-vejs ANOVA analyse for gentagne målte data (pels score og kropsvægt), og en multivariat analyse proces af variansen blev vedtaget for at foretage sammenligninger mellem grupper på hver gang pege (LSD metode).
Den fysiske tilstand af CUMS-induceret mus
Efter udsætter mus til tre uger af CUMS til induktion af depression, blev en gradvis dystrofi frakke stats i modelgruppen induceret; dystrofi ikke præsentere efter to uger af stress, men det forværredes i slutningen af proceduren CUMS (tre uger), og pels score faldt betydeligt sammenlignet med kontrolgruppen (F (3, 56) = 25.08, p = 0.000). Tilstanden frakke af mus blev især forbedret efter kontinuerlig behandling med Xiaoyaosan eller fluoxetin i forhold til modelgruppen (F (3, 56) = 25.08, både p = 0,001, figur 1a). Ifølge den ugentlige organ vægt data for hver gruppe, en væsentlig reduktion i kropsvægt blev manifesteret ved den tredje uge (F (3, 56) = 16.149, p = 0.000, figur 1b), mens Xiaoyaosan eller fluoxetin behandling steget betydeligt kroppen vægt sammenlignet med modelgruppen (F (3, 56) = 16.149, både p = 0,001).
Saccharose præference test
Før stress eksponering havde mus i alle grupper en lignende saccharose præference (hidtidige tilstand, figur 2a). Imidlertid en betydelig nedgang i saccharose præference blev observeret efter tre uger af stress procedure i modelgruppen (F (3, 56) = 41.379, p = 0.000, figur 2b). Xiaoyaosan og fluoxetin behandling effektivt vendt disse ændringer og øget væsentligt saccharose præference sammenlignet med modelgruppen (F (3, 56) = 41.379, begge p = 0.000).
Open field test
Før stress eksponering udstillet alle mus en lignende adfærdsmæssige tilstand (baseline betingelser. Figur 2 c og 2d). Men efter stress eksponering for tre uger, den samlede distance flyttede i fem minutter væsentligt afveg mellem grupperne. Den samlede distance flyttet af mus i modelgruppen var betydeligt lavere (F (3, 56) = 4.216, p = 0,003, figur 2f) end i kontrolgruppen. Desuden, antallet af poster i den centrale zone var også væsentligt anderledes mellem grupper. Antallet af poster i den centrale zone af modelgruppe faldt betydeligt (F (3, 56) = 2.809, p = 0,013, figur 2e) sammenlignet med kontrolgruppen. Fluoxetin behandling forhindret disse ændringer i bevægelse tendens og væsentligt forbedret den samlede distance og antallet af poster i den centrale zone (F (3, 56) = 4.216, p = 0.029; F (3, 56) = 2.809, p = 0,004). Et lignende fænomen blev også observeret i gruppen Xiaoyaosan behandling (F (3, 56) = 4.216, p = 0.014; F (3, 56) = 2.809, p = 0.029).
Figur 1 : Effekter af Xiaoyaosan på CUMS-inducerede ændringer i mus tilstandsform. Musene pels state (en) og kropsvægt (b) blev målt ugentligt i perioden stress. Data blev udtrykt som den gennemsnit ± SEM, n = 15 pr. gruppe. ** p < 0,001 versus kontrol; ΔΔ p < 0,001 versus modellen. Dette tal er blevet ændret fra Ding, et al. 18 Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2 : Effekter af Xiaoyaosan på CUMS-induceret depressive-lignende opførsel. Et batteri af adfærdsmæssige test blev udført, og følgende parametre blev målt: saccharose præference (a, b), antallet af poster i zonen center (c, e), og den samlede distance flyttet (bevægeapparatet aktivitet) (d, f). Data blev udtrykt som den gennemsnit ± SEM, n = 15 pr. gruppe. * p < 0,05, *p < 0,01 og *p < 0,001 versus kontrol; Δ p < 0,05, ΔΔp < 0,01 og ΔΔΔp < 0,001 versus model. Dette tal er blevet ændret fra Ding, et al. 18 Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
CUMS model anvendt i denne undersøgelse er en fælles metode til at skabe stress diatese model af depression24. De fleste manifestationer af CUMS kan gendannes af antidepressive lægemidler, hvoraf det fremgik, at denne model metode har en stærk forudsigende gyldighed25. Ved denne metode, dyr får kronisk uforudsigelige stressende stimuli og udvikle core symptomer på svær depression, herunder nedsat sted præference conditioning, irritabilitet og nedsat følelse-lignende adfærd26. Her, i denne protokol, kan den løbende brug af Xiaoyaosan eller fluoxetin forbedre den depressive-lignende opførsel af CUMS-induceret modelmus ifølge resultaterne af forsøget; fluoxetin er som en positiv kontrol stof at bevise intervention effekten af Xiaoyaosan.
Evaluering af pels score, i modsætning til feltet åben test, tvunget svømning test, eller nyhed undertrykt fodring test, er en foranstaltning, der er ikke knyttet til depression hos mennesker, men er den mest udbredte, pålidelig og godt valideret metode for den depressive model musen27. I den foreliggende undersøgelse, en gradvis dystrofi stats frakke i modelgruppen blev induceret og præsentere ikke efter to uger af stress men forværredes i slutningen af proceduren CUMS (tre uger), mens kropsvægten ikke var signifikant forskellig blandt grupper efter en uge efter stress eksponering. Forskellen i legeme last i hver gruppe begyndte at dukke op efter modellering for to uger, hvilket førte til et efterfølgende fald i slutningen af tre uger. Resultaterne viser, at disse ændringer i fysiske tilstand af CUMS-induceret mus kunne være omvendt af både Xiaoyaosan og fluoxetin behandling, tyder på, at Xiaoyaosan kunne forbedre de fysiske tilstande af deprimeret mus.
For yderligere at validere CUMS model og kontrollere virkningen af stoffet anvendes i denne protokol, blev en saccharose præference test og en åben field test anvendt til at vurdere de mulige depressive adfærd i CUMS-induceret mus. Reduktion af anhedonia i saccharose præference blev brugt til at evaluere den depressive-lignende tilstand i gnavere, mens open field test, som en dyr psykologiske test, er almindeligt anvendt til at evaluere bevægeapparatet funktion og emotionalitet gnavere28. Resultatet viste, at 3 uger af stress eksponering havde en indlysende indflydelse på saccharose præference af mus, og anhedonia blev vendt ved både Xiaoyaosan og fluoxetin behandlinger. Open field test er almindeligt anvendt til at vurdere bevægeapparatet funktion og emotionalitet i laboratoriet dyr29. I denne undersøgelse, blev det brugt til at analysere depressiv adfærd. Resultaterne af open field test viste, at den samlede afstand flyttet af mus i modelgruppen var betydeligt lavere end i kontrolgruppen. Desuden, antallet af poster i den centrale zone af modelgruppe af mus var væsentligt lavere end gruppen behandling af musene, som foreslog at CUMS-induceret mus vises depressive-lignende adfærd. Undersøgelsen viste også, at Xiaoyaosan og fluoxetin kunne rette op på de ændringer, der er præsenteret i open field test.
Efter aftale med de lignende resultater diskuteret i tidligere undersøgelser, viste dette papir at CUMS forårsager et fald i saccharose forbrug og bevægeapparatet aktivitet. Den løbende brug af Xiaoyaosan var effektiv til forebyggelse og behandling af CUMS-induceret depression i mus. Mange studier har undersøgt depression, en avanceret forståelse af en dyremodel kunne være nøglen til at tydeliggøre mekanismen af depression30. CUMS i denne protokol beskrevne metode kan effektivt vise depression tilstand af mus. I modsætning til den kroniske mild stress (CMS) eller kronisk immobilisering stress (CIS) metode31,32ligger den centrale punkt CUMS i udvælgelsen af uforudsigelige stressfaktorer og rationel anvendelse af model evaluering. For at yderligere bekræfter metode og resultat vist i denne protokol, bør fremtidige arbejde omfatte udvælgelse af flere stressfaktorer og evalueringsmetoder for CUMS metode og påvisning af de langsigtede virkninger af Xiaoyaosan for 28-48 dage af CUMS.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ikke noget at oplyse.
Acknowledgments
Denne forskning blev støttet af tilskud fra National Natural Science Foundation of China (nr. 81630104, nr. 81473597), og den grundlæggende forskningsmidler til Central universiteter (nr. 2018-JYBZZ-XS005). Protokol og resultater fremgår af dette papir stammer fra artikel Inddragelse af normaliserede Glial fibrillære sure Protein udtryk i Hippocampi i Antidepressant-Like effekter af Xiaoyaosan på kronisk stressede mus af Dr. Xiu-Fang Ding, et al.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chinese Herbs | Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company | - | The drugs were extracted by the Chinese medicine preparation room of the China-Japan Friendship Hospital, distilled water was used to prepare the suspension of Xiaoyaosan, and the dose was 0.25 g/kg/d. |
| Fluoxetine | PATHEON FRANCE | 5545A | The distilled water was used to prepare the suspension of fluoxetine, and the dose 2.6 mg/kg/d. |
| C57BL/6j mice | Beijing Vital River of the Charles River Company | SCXK 2011-0004 | 60 healthy male C57BL/6J mice aged 12 weeks were purchased from Beijing Vital River of the Charles River Company. |
| Mouse cage | Styling Biotechnology | 34853016 | 318×202×135 mm |
| Distilled Water | - | - | The water was used througout the experiment. |
| Sucrose | Sigma | - | The sucrose was used in the sucrose preference test to prepare 1% sucrose solution. |
| ACS-2EAS Electronic Balance | Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd. | - | It was used to weigh the avoirdupois of mice at different stages. |
| Wooden Black Lusterless Box | - | - | (40 cm x 40 cm x 15 cm), divided into 25 equal squares by blue lines. |
| WV-CP470 Camera | Panasonic, Japan | - | A HD digital camera which was used for recording the whole process of the open field test. |
| Etho Vision 3.0 Software | Noldus, Wageningen, Holland | - | A video-tracking system which was used to evaluate the locomotor function and emotionality of mice. |
| SPSS Statistics 21.0 Software | IBM | - | SPSS 21.0 software was used to analyze the data, one-way ANOVA or non-parametric test was used for general data based on normality test and homogeneity test for variance, and LSD method was adopted for the comparisons between groups. |
| Graphpad Prism 6.0 Software | Graphpad Software,Inc.USA | - | Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs. |
References
- Chrousos, G. P., Gold, P. W. The concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis. JAMA. 267 (9), 1244-1252 (1992).
- Yao, Y., Huang, H. Y., Yang, Y. X., Guo, J. Y. Cinnamic aldehyde treatment alleviates chronic unexpected stress-induced depressive-like behaviors via targeting cyclooxygenase-2 in mid-aged rats. Journal of Ethnopharmacology. 162, 97-103 (2015).
- Murray, C. J., Lopez, A. D. Global health statistics: a compendium of incidence prevalence and mortality estimates for over 200 conditions. World Health Organization Harvard School of Public Health World Bank. , ii (1996).
- Sackeim, H. A. The definition and meaning of treatment-resistant depression. Journal of Clinical Psychiatry. 62 (16), 10-17 (2001).
- Li, W., et al. The effect of compounds of soothing liver, invigorating spleen, tonifying kidney on the praxiology and immunological function of chronic immobilization stressed rats. Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica. 11, 33-37 (2003).
- Meng, Z. Z., Chen, J. X., Jiang, Y. M., Zhang, H. T. Effect of Xiaoyaosan Decoction on Learning and Memory Deficit in Rats Induced by Chronic Immobilization Stress. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2013 (17), 297154 (2013).
- Zhao, H., Wan, X., Chen, J. X. A mini review of traditional Chinese medicine for the treatment of depression in China. American Journal of Chinese Medicine. 37 (02), 207-213 (2009).
- Gao, X., et al. Metabonomic study on chronic unpredictable mild stress and intervention effects of Xiaoyaosan in rats using gas chromatography coupled with mass spectrometry. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 690-699 (2011).
- Li, P., et al. CNP signal pathway up-regulated in rectum of depressed rats and the interventional effect of Xiaoyaosan. World Journal of Gastroenterology. 21 (5), 1518 (2015).
- Li, X. J., et al. Xiaoyaosan exerts anxiolytic-like effects by down-regulating the TNF-α/JAK2-STAT3 pathway in the rat hippocampus. Scientific Reports. 7 (1), 353 (2017).
- Jun-Sheng, T., et al. Dynamic analysis of the endogenous metabolites in depressed patients treated with TCM formula Xiaoyaosan using urinary (1)H NMR-based metabolomics. Journal of Ethnopharmacology. 158, 1-10 (2014).
- Dai, Y., et al. Metabolomics study on the anti-depression effect of xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 128 (2), 482-489 (2010).
- Zhou, Y., et al. Antidepressant-like effects of the fractions of Xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress. Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 236-244 (2011).
- Wang, P. S., et al. The Costs and Benefits of Enhanced Depression Care to Employers. Archives of General Psychiatry. 63 (12), 1345-1353 (2006).
- Pirraglia, P. A., Rosen, A. B., Hermann, R. C., Olchanski, N. V., Neumann, P. Cost-utility analysis studies of depression management: a systematic review. American Journal of Psychiatry. 161 (12), 2155-2162 (2004).
- Wang, S. X., et al. Xiaoyaosan Decoction Regulates Changes in Neuropeptide Y and Leptin Receptor in the Rat Arcuate Nucleus after Chronic Immobilization Stress. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. 2012 (4), 381278 (2012).
- Zhu, X., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of β-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus. Evidence-based Complementary and Alternative. 2014, (2014).
- Ding, X. F., et al. Involvement of Normalized Glial Fibrillary Acidic Protein Expression in the Hippocampi in Antidepressant-Like Effects of Xiaoyaosan on Chronically Stressed Mice. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2017, 1960584 (2017).
- Ding, X. F., et al. Involvement of the glutamate/glutamine cycle and glutamate transporter GLT-1 in antidepressant-like effects of Xiao Yao san on chronically stressed mice. BMC Complementary & Alternative Medicine. 17 (1), 326 (2017).
- Murua, V. S., Gomez, R. A., Andrea, M. E., Molina, V. A. Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress: reversal by imipramine administration. Pharmacol Biochem Behav. 38 (1), 125 (1991).
- Duan, J. J., et al. Pharmacokinetics of 5-fluorouracil and cyclophosphamide in depression rats. European Review for Medical & Pharmacological Sciences. 16 (4), 427-436 (2012).
- Cao, X., et al. Astrocyte-derived ATP modulates depressive-like behaviors. Science Foundation in China. 19 (1), 56 (2013).
- Kirshenbaum, G. S., et al. Decreased neuronal Na+, K+ -ATPase activity in Atp1a3 heterozygous mice increases susceptibility to depression-like endophenotypes by chronic variable stress. Genes Brain & Behavior. 10 (5), 542-550 (2011).
- Liu, X. J., et al. Urinary metabonomic study using a CUMS rat model of depression. Magnetic Resonance in Chemistry. 50 (3), 187-192 (2012).
- Zhu, S., et al. Unpredictable chronic mild stress induces anxiety and depression-like behaviors and inactivates AMP-activated protein kinase in mice. Brain Research. 1576, (2014).
- Yang, C., Wang, G., Wang, H., Liu, Z., Wang, X. Cytoskeletal alterations in rat hippocampus following chronic unpredictable mild stress and re-exposure to acute and chronic unpredictable mild stress. Behavioural Brain Research. 205 (2), 518-524 (2009).
- Ding, X. F., et al. Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behaviors in Rats with Chronic Immobilization Stress through Modulation of Locus Coeruleus-Norepinephrine System. Evidence-Based Complementary and Alternative. , 605914 (2014).
- Wu, L. L., et al. Antidepressant-Like Effects of Fractions Prepared from Danzhi-Xiaoyao-San Decoction in Rats with Chronic Unpredictable Mild Stress: Effects on Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis, Arginine Vasopressin, and Neurotransmitters. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2016 (3), 1-11 (2016).
- Stanford, S. C. The Open Field Test: reinventing the wheel. Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134 (2007).
- Zeldetz, V., et al. A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats. Journal of Visualized Experiments. (132), e57137 (2018).
- Willner, P. Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS. Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).
- Wood, G. E., Norris, E. H., Waters, E., Stoldt, J. T., Mcewen, B. S. Chronic immobilization stress alters aspects of emotionality and associative learning in the rat. Behavioral Neuroscience. 122 (2), 282-292 (2008).
