Un metodo visivo sensibile per il rilevamento di batteri produttori di idrogeno solforato

Inizia con una piastra contenente una sospensione di vari batteri produttori di idrogeno solforato in grado di metabolizzare composti ricchi di zolfo.

Aggiungere una soluzione di cloruro di bismuto che contenga L-cisteina come fonte di zolfo e incubare brevemente la miscela.

Durante l'incubazione, i batteri utilizzano la L-cisteina e producono idrogeno solforato, che reagisce con gli ioni bismuto per formare un precipitato insolubile di solfuro di bismuto nero.

Questa reazione cambia il colore della soluzione dal giallo chiaro al nero, indicando la produzione di idrogeno solforato.

Successivamente, eseguire il test utilizzando concentrazioni variabili di idrosolfuro di sodio come standard di idrogeno solforato e aggiungere cloruro di bismuto.

Questo genera un gradiente di colore che va dal nero chiaro al nero intenso, che rappresenta i livelli di idrogeno solforato.

Ora, utilizza questo gradiente per confrontare e stimare visivamente i livelli di idrogeno solforato nei campioni batterici, consentendo il rilevamento rapido dei batteri produttori di idrogeno solforato.

Mescolare 100 microlitri di coltura batterica con 100 microlitri di soluzione di bismuto appena preparata nelle piastre per microtitolazione a 96 pozzetti e coltivare per 20 minuti a 37 gradi Celsius. Per ogni ceppo batterico, eseguire l'analisi in triplice copia.

Dopo 20 minuti, controllare il cambiamento di colore. Se il colore della soluzione cambia da giallo chiaro a nero, ciò indica che il batterio è in grado di produrre idrogeno solforato o H2S. Ripetere questa misurazione tre volte.

Determinare la sensibilità del metodo utilizzando diverse concentrazioni di idrosolfuro di sodio miscelato con una soluzione di solfuro di bismuto. Infine, determinare la presenza di bisolfuro e ioni solfuro osservando la formazione di un precipitato nero di solfuro di bismuto. Segna il colore dei pozzetti utilizzando una scala visiva che va da nessuna produzione di colore alla produzione di colore nero più scuro.