Isolamento funzionalizzato delle cellule bersaglio basate su fili: una tecnica ex vivo per isolare le cellule tumorali dal sangue periferico spiked

Le molecole di adesione delle cellule epiteliali, o EpCAM, sono glicoproteine transmembrana di superficie sovraespresse nelle cellule epiteliali a rapida proliferazione nei tumori della prostata. Per isolare le cellule che esprimono EpCAM, iniziare con un filo di grado medico con una punta rivestita d'oro funzionalizzato. La funzionalizzazione stratifica un gel polimerico contenente anticorpi specifici per EpCAM legati covalentemente.

Immergere il filo in una sospensione di sangue periferico contenente cellule tumorali marcate in modo fluorescente. Assicurarsi che la parte funzionalizzata rimanga immersa nella sospensione di sangue. Gli EpCAM sulle cellule tumorali riconoscono e si legano ai loro anticorpi specifici funzionalizzati sul filo.

Lavare con un tampone per rimuovere eventuali celle non legate dalla superficie del filo. Piegare il filo e montarlo su un vetrino contenente tampone, con la parte funzionalizzata immersa nel tampone. Utilizzare un microscopio a fluorescenza per controllare la fluorescenza luminosa dal citoplasma cellulare e dai nuclei e confermare la presenza di cellule catturate sul filo.

Trattare il filo con un tampone di rilascio. Gli enzimi proteolitici ne