Saggio basato sulla bioluminescenza cellulare: un metodo ad alto rendimento per lo screening combinatorio di farmaci
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0 visualizzazioni • 3:17 min. • April 30th, 2023
La bioluminescenza cellulare è un approccio altamente sensibile e rapido per lo screening su larga scala di farmaci antitumorali.
Questa tecnica utilizza cellule tumorali che esprimono luciferasi, un enzima che catalizza una reazione chimica che produce luce, facendo brillare le cellule ospiti al buio. L'intensità della luminescenza emessa è direttamente proporzionale alla densità delle cellule vive.
Per iniziare, seminare le cellule che esprimono luciferasi in una piastra di coltura otticamente trasparente rivestita con una matrice extracellulare o ECM e incubarle.
Durante l'incubazione, la ECM favorisce bene l'adesione delle cellule alla coltura.
Successivamente, prendere le scorte concentrate della combinazione di farmaci e aggiungere diversi volumi di terreni di coltura per preparare la diluizione seriale della miscela di farmaci.
Ora, rimuovere il terreno di coltura dalle cellule aderenti. Aggiungere diverse diluizioni della combinazione di farmaci e incubare.
Durante l'incubazione, la combinazione di farmaci agisce sinergicamente sui bersagli cellulari.
Ora, rimuovi il terreno contenente il farmaco e aggiungi il terreno fresco contenente luciferina.
La luciferina si diffonde
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