JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 5:29 min. • July 8th, 2025
Prendi un vetrino di flusso contenente un doppio strato lipidico supportato, o SLB.
L'SLB è coniugato a ligandi specifici - molecola di adesione intercellulare 1 o ICAM-1 e anticorpi anti-CD3 - marcati con fluorofori.
Aggiungi cellule T e anti-CD107a Fab marcato con fluoroforo, il frammento legante l'antigene di un anticorpo contro il marcatore di degranulazione.
Il complesso recettore-CD3 o TCR-CD3 delle cellule T si lega all'anticorpo anti-CD3, innescando il TCR.
La segnalazione inside-out indotta dall'innesco attiva le integrine sulla superficie, che si legano all'ICAM-1 immobilizzato.
La coniugazione induce la riorganizzazione del citoscheletro, il riarrangiamento dei microtubuli e la polimerizzazione dell'actina che porta alla diffusione laterale della cellula sulla superficie SLB.
La diffusione consente a più interazioni ligando-recettore di formare un cluster di attivazione supramolecolare o SMAC, creando una sinapsi immunitaria.
I granuli litici delle cellule T si muovono lungo i microtubuli e si fondono con la membrana plasmatica, esponendo i marcatori di degranulazione sulla superficie cellulare, che si legano all'anti-CD107a Fab.
Utilizzando un microscopio a fluorescenza
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici