La tecnica di fotoconversione per esplorare la dinamica delle cellule infiammatorie nelle pupe di insetti
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:44 min. • July 8th, 2025
Inizia con un piatto con fondo di vetro contenente pupe di Drosophila transgeniche che trasportano epitelio ferito marcato con le loro proteine di superficie cellulare che mostrano fluorescenza verde.
Le cellule immunitarie delle pupe, o emociti, esprimono fluorofori verdi fotoconvertibili nel citoplasma e proteine fluorescenti rosse nel nucleo, facilitando il tracciamento cellulare.
Le cellule ferite rilasciano chemioattrattivi o molecole infiammatorie, attirando gli emociti verso il sito ferito.
La microscopia confocale rivela l'area ferita circondata da cellule epiteliali verdi.
Durante la guarigione, gli emociti verdi con nuclei rossi vicino alla ferita estendono le sporgenze della membrana - filopodi e lamellipodi e migrano verso l'area ferita.
Nel tempo, man mano che il chemioattrattivo si diffonde, gli emociti distanti migrano verso la ferita, creando un'onda di cellule immunitarie.
Illumina la sottopopolazione di emociti migratori con una lunghezza d'onda di 405 nanometri. Questo converte irreversibilmente il fluoroforo fotoconvertibile degli emociti da verde a rosso.
Questi emociti fotoconvertiti riparano l'epitelio ferito e si allontanano dal sito della ferita, differenzi
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