Sviluppo di un modello 3D ingegnerizzato basato su seta-collagene di tessuto neurale polarizzato
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:14 min. • July 8th, 2025
Posizionare gli scaffold di seta porosa a forma di ciambella, rivestiti di poli-D-lisina, in una piastra a più pozzetti.
Aggiungere terreni di coltura per idratare gli scaffold, facilitando l'adesione delle cellule.
Aspirare il terreno in eccesso. Seminare gli scaffold con una sospensione di cellule neuronali e incubare.
La superficie rivestita e i pori dell'impalcatura forniscono un'ampia superficie per l'adesione di cellule ad alta densità e facilitano un'efficiente diffusione di nutrienti e rifiuti.
Rimuovi le cellule non attaccate e aggiungi il collagene, una proteina della matrice extracellulare.
Incubare per la polimerizzazione del collagene. Questo processo incorpora le cellule all'interno di una matrice 3D gelatinosa sull'impalcatura porosa.
Aggiungi file multimediali. Coltivare e sostituire regolarmente metà dei terreni di coltura per reintegrare i nutrienti senza disturbare le cellule.
All'interno della coltura, i corpi cellulari neuronali rimangono ancorati all'impalcatura di seta mentre gli assoni crescono attraverso la matrice di collagene, formando reti assonali 3D.
Questa localizzazione del corpo cellulare e degli assoni compartimentalizzati porta alla formazione di
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