Elaborazione di un cervello di topo per l'analisi a valle

Prendi un cervello di topo appena raccolto e congelalo in isopentano pre-raffreddato per una rapida conservazione dei tessuti.

Quindi, trasferisci il cervello, con la corteccia rivolta verso l'alto, in una matrice cerebrale congelata per mantenere un ambiente freddo durante l'affettatura.

Lasciare che il cervello si equilibri alla temperatura della matrice. Allinearlo nella matrice lungo i seni sagittali e trasversali per garantire sezioni simmetriche.

Inserire le lame raffreddate nel cervello, assicurandosi che il corretto allineamento sia corretto.

Quindi, premili in modo uniforme per ottenere sezioni cerebrali uniformi.

Togliete le lame con le sezioni e posizionatele, con il rovescio verso l'alto, su una lastra di vetro congelata.

Organizzare le sezioni dall'orientamento rostrale a quello caudale nell'ordine anatomico corretto. Ora, separali.

Utilizzando un riferimento cerebrale adatto, individuare ed eliminare la regione di interesse dalla sezione.

Trasferire il tessuto asportato in una fiala pre-raffreddata per l'analisi a valle.

Dopo aver rimosso il cervello da topi adulti CD-1 di tipo selvaggio soppressi, congelare il tessuto per 60 secondi in azoto liquido o isopentano prer