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DOI: 10.3791/51216-v
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Descriviamo un disegno di esperimenti approccio che può essere utilizzato per determinare e modellare l'influenza del transgene elementi regolatori, parametri di crescita e sviluppo delle piante, e condizioni di incubazione sulla espressione transiente di anticorpi monoclonali e proteine reporter nelle piante.
L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di generare modelli predittivi per l'espressione transitoria di proteine nelle foglie delle piante. Ciò si ottiene mettendo a punto un disegno sperimentale per identificare i parametri più importanti per l'espressione transitoria e quantificare il loro impatto sull'accumulo di proteine. In una seconda fase, i geni vengono clonati e trasferiti in agrobatteri, che vengono poi iniettati nelle foglie con conseguente espressione proteica transitoria.
I campioni di foglie successive vengono analizzati per determinare i livelli di espressione proteica. Si ottengono risultati che mostrano il pattern dei livelli di espressione proteica transitoria in foglie di diverse età e per diverse condizioni di incubazione sulla base di un disegno di valutazione del modello sperimentale. Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti, come un fattore alla volta, è che le interazioni tra diversi parametri come l'età delle foglie o la posizione delle foglie possono essere rilevate e quantificate.
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